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血浆纤维蛋白原测定方法

1.测定方法概述

凝血酶凝固法（Clauss法）：通过凝血酶将血浆中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白，根据血浆凝固时间与纤维蛋白原浓度之间的负相关性，计算其含量。

比浊法（PT衍生法）：利用纤维蛋白原转化为纤维蛋白后产生的浊度变化，通过比浊原理测定其浓度。

免疫学方法：利用抗体与纤维蛋白原的特异性结合反应进行测定，包括免疫浊度法、单向免疫扩散法和酶联免疫吸附试验（ELISA）等。

2.测定方法的具体操作

（1）凝血酶凝固法（Clauss法）

原理：凝血酶作用于纤维蛋白原，促使其转化为纤维蛋白，血浆凝固。在凝血酶浓度较高（约100NIH/ml）和纤维蛋白原浓度较低（0.05—0.8g/L）的条件下，凝固时间与纤维蛋白原浓度呈负相关。

步骤：

1.准备待测血浆样本。

2.加入一定量的凝血酶试剂。

3.使用凝血分析仪或人工观察记录凝固时间。

4.将凝固时间与标准曲线对比，得出纤维蛋白原浓度。

适用范围：广泛用于临床凝血功能检测，尤其是弥散性血管内凝血（DIC）的辅助诊断和溶栓治疗的监测。

（2）比浊法（PT衍生法）

原理：纤维蛋白原在凝血酶作用下转化为纤维蛋白后，其形成的浊度与纤维蛋白原含量成正比。

步骤：

1.在血浆样本中加入凝血酶。

2.使用比浊仪测量浊度变化。

3.根据浊度变化速率或终点浊度值，计算纤维蛋白原浓度。

优点：无需额外试剂，操作简便，适合自动化检测。

（3）免疫学方法

原理：利用抗纤维蛋白原抗体与纤维蛋白原的特异性结合反应，通过免疫浊度法、单向免疫扩散法或ELISA等方法测定纤维蛋白原含量。

步骤：

1.准备纤维蛋白原抗体。

2.将抗体与待测样本混合。

3.测量结合反应后的光密度或浊度。

4.通过标准曲线计算纤维蛋白原浓度。

特点：特异性强，适用于复杂样本的检测。

3.注意事项

样本采集：采血前需空腹，避免进食高脂或刺激性食物，以减少对检测结果的影响。

试剂选择：使用高质量的凝血酶试剂和校准品，确保测定结果的可靠性。

仪器校准：定期校准凝血分析仪，确保测量精度。

质量控制：使用标准质控血浆进行质量控制，确保实验结果的稳定性。

4.临床应用

凝血功能障碍的诊断：评估患者是否存在先天性或后天性纤维蛋白原缺乏。

DIC的辅助诊断：监测弥散性血管内凝血的严重程度。

抗凝或溶栓治疗监测：评估治疗效果及调整治疗方案。

5.测定方法的优缺点比较

（1）凝血酶凝固法（Clauss法）

优点：

简单易行，操作方便。

对设备要求较低，适用于大多数临床实验室。

结果可靠，与临床诊断的相关性较高。

缺点：

对样本质量要求较高，样本需新鲜且无污染。

测定时间较长，不适合急诊检测。

（2）比浊法（PT衍生法）

优点：

测定速度快，适合急诊检测。

测定范围广，适用于高浓度和低浓度的纤维蛋白原样本。

缺点：

对仪器设备要求较高，需要配备比浊仪。

对试剂质量要求严格，需避免试剂污染。

（3）免疫学方法

优点：

特异性强，不受其他血浆成分干扰。

测定结果稳定，重复性好。

缺点：

操作复杂，需要专业技术人员。

成本较高，不适合常规检测。

6.技术发展前景

自动化检测：通过自动化凝血分析仪，实现纤维蛋白原测定的全自动化操作，提高检测效率。

便携式设备：开发便携式凝血分析仪，方便在床旁或基层医疗机构进行快速检测。

多参数联合检测：结合其他凝血指标，如凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）等，进行多参数联合检测，提供更全面的凝血功能评估。

血浆纤维蛋白原测定是临床诊断和治疗的重要手段。根据不同的临床需求和实验室条件，可选择合适的测定方法。同时，随着检测技术的不断发展，血浆纤维蛋白原的测定将更加高效、准确，为临床提供更有力的支持。