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目录
目录I
摘要IV
AbstractVI
1前言1
1.1植物的防御反应1
1.2植物的模式识别受体FLS22
1.3植物防御反应中的MAPK的信号转导2
1.4植物防御反应中的细胞程序性死亡4
1.5研究的目的与意义6
1.6技术路线7
2材料与方法8
2.1实验材料8
2.1.1植物材料与菌株8
2.1.2实验仪器8
2.1.3主要试剂9
2.1.4主要培养基9
2.2PpFLS2L生物信息学分析9
2.3载体的构建10
2.4PpFLS2L的亚细胞定位13
2.5异源表达PpFLS2L拟南芥的转化13
2.6PpFLS2L与PpMAPKKK互作分析16
2.7几丁质处理后MAPK酶活性的检测17
2.8几丁质处理后MAPK磷酸化的检测18
2.9几丁质处理后细胞程序性死亡的检测20
2.9.1几丁质处理后小立碗藓细胞组织染色20
2.9.2几丁质处理后细胞程序性死亡相关基因的转录分析21
2.9.3几丁质处理后RBOHD的表达及ROS的总量21
2.9.4几丁质处理后HO、O-的染色22
222
2.10灰霉菌侵染植株22
2.10.1灰霉菌侵染后小立碗藓、拟南芥表型观察22
2.10.2灰霉菌侵染后RBOHD的表达及ROS的总量23
2.10.3灰霉菌侵染后小立碗藓、拟南芥HO、O-的染色23
222
3结果与分析24
3.1小立碗藓PpFLS2L序列分析24
3.2小立碗藓PpFLS2L亚细胞定位25
3.3异源表达PpFLS2L拟南芥的获得27
3.3.1异源表达PpFLS2L拟南芥载体的构建27
3.3.2异源表达PpFLS2L拟南芥植株鉴定27
3.3.3异源表达PpFLS2L拟南芥形态特征28
3.4PpFLS2L介导MAPK信号通路30
3.4.1PpFLS2L与PpMAPKKK互作30
3.4.2PpFLS2L影响几丁质处理后MAPK的酶活性32
3.4.3PpFLS2L影响几丁质处理后MAPK激酶磷酸化32
3.5PpFLS2L影响类细胞程序性死亡33
3.5.1PpFLS2L影响几丁质处理后小立碗藓细胞核形态特征33
3.5.2PpFLS2L影响几丁质处理后细胞程序性死亡相关基因的表达
35
3.5.3PpFLS2L影响几丁质处理后RBOHD的表达、ROS的总量36
3.6PpFLS2L与苔藓植物对病原菌互作有关39
3.6.1PpFLS2L影响灰霉菌侵染后小立碗藓、拟南芥的表型39
3.6.2PpFLS2L影响灰霉菌侵染后RBOHD的表达、ROS的总量40
4结论与讨论43
4.1小立碗藓PpFLS2L与维管束植物FLS2功能出现分化43
4.2小立碗藓中MAPK途径是PpFLS2L下游的信号通路43
4.3
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