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阿勒泰羊胚胎PDGFD基因编辑研究.docx

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阿勒泰羊胚胎PDGFD基因编辑研究

阿勒泰羊胚胎PDGFD基因编辑研究（1）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

一、研究背景与目的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

阿勒泰羊产业现状及重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

PDGFD基因的功能与特点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

基因编辑技术在畜牧业的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

二、研究方法与材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

1.1阿勒泰羊胚胎采集与保存．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

1.2PDGFD基因序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

1.3CRISPRCas9基因编辑系统构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

2.1基因序列克隆与表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

2.2胚胎基因编辑操作过程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

2.3分子生物学检测方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

三、实验结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

PDGFD基因序列分析结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

胚胎基因编辑效率及安全性评估结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

基因编辑对阿勒泰羊生长性能的影响分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

基因编辑对其他生物学特性的影响分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

四、讨论与结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

结果分析与讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

本研究的创新点与局限性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

对未来研究的建议与展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

阿勒泰羊胚胎PDGFD基因编辑研究（2）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

一、内容概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

1.2研究意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

1.3研究目的与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

二、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

2.1.1实验动物．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

2.1.2实验材料来源．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

2.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

2.2.1基因编辑技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

2.2.2胚胎培养技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

2.2.3表型鉴定方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

三、阿勒泰羊胚胎PDGFD基因表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

3.1PDGFD基因序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．

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