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2025年淀粉酶活力测定.pdfVIP

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士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?——《论语》

淀粉酶活力测定

太上有立德,其次有立功,其次有立言,虽久不废,此谓不朽。——《左传》

淀粉酶活力的测定

一、目的

学习和掌握测定淀粉酶(包括α-淀粉酶和β-淀粉酶)活力的原理和方法。

二、原理

淀粉是植物最主要的贮藏多糖,也是人和动物的重要食物和发酵工业的基

本原料。淀粉经淀粉酶作用后生成葡萄糖、麦芽糖等小分子物质而被机体利用。

淀粉酶主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶两种。α-淀粉酶可随机地作用于淀粉中

的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀

粉的粘度降低,因此又称为液化酶。β-淀粉酶可从淀粉的非还原性末端进行水

解,每次水解下一分子麦芽糖,又被称为糖化酶。淀粉酶催化产生的这些还原

糖能使3,5-二硝基水杨酸还原,生成棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,其反应

如下:

淀粉酶活力的大小与产生的还原糖的量成正比。用标准浓度的麦芽糖溶液制

作标准曲线,用比色法测定淀粉酶作用于淀粉后生成的还原糖的量,以单位

重量样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力。

淀粉酶存在于几乎所有植物中,特别是萌发后的禾谷类种子,淀粉酶活力最

强,其中主要是α-淀粉酶和β-淀粉酶。两种淀粉酶特性不同,α-淀粉酶不耐

酸,在pH3.6以下迅速钝化。β-淀粉酶不耐热,在70℃15min钝化。根据它们

的这种特性,在测定活力时钝化其中之一,就可测出另一种淀粉酶的活力。本

实验采用加热的方法钝化β-淀粉酶,测出α-淀粉酶的活力。在非钝化条件下

测定淀粉酶总活力(α-淀粉酶活力+β-淀粉酶活力),再减去α-淀粉酶的活

力,就可求出β-淀粉酶的活力。

三、实验材料、主要仪器和试剂

1.实验材料

萌发的小麦种子(芽长约1cm)

2.仪器

太上有立德,其次有立功,其次有立言,虽久不废,此谓不朽。——《左传》

好学近乎知,力行近乎仁,知耻近乎勇。——《中庸》

非淡泊无以明志,非宁静无以致远。——诸葛亮

酶活力测定取样表

操作项目α-淀粉酶活力测

定β-淀粉酶活力测定

Ⅰ-1Ⅰ-2Ⅰ

-3Ⅱ-4Ⅱ-5Ⅱ-6

淀粉酶原液(mL)1.01.0

1.0000

钝化β-淀粉酶置70℃水浴15min,

冷却

淀粉酶稀释液(mL)000

1.01.01.0

3,5-二硝基水杨酸(mL)2.000

2.00.0

预保温将各试管和淀粉溶

液置于40℃恒温水浴中保温10min

1%淀粉溶液(mL)

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