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药品的微生物学检查.ppt

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菌膜生长第31页,共62页,星期日,2025年,2月5日第32页,共62页,星期日,2025年,2月5日第33页,共62页,星期日,2025年,2月5日第34页,共62页,星期日,2025年,2月5日3.中草药、抗生素抑菌试验第35页,共62页,星期日,2025年,2月5日纸片法第36页,共62页,星期日,2025年,2月5日六、革兰染色法原理:革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁差异应用方法标本片制备革兰染色结果第37页,共62页,星期日,2025年,2月5日2.革兰染色(1)初染:滴加结晶紫染液l~2滴,1分钟.水洗(2)媒染:滴加碘液,l~2滴,作用1分钟后水洗。(3)脱色:滴加95%酒精数滴,(约15~30秒),立即水洗。(4)复染:滴加稀释复红染液1~2滴,作用1分钟后水洗。(5)结果:牙垢标本中革兰阳性菌染成紫色,革兰阴性菌染成红色。其中真菌(白色念珠菌)染成紫色,而螺旋体等被染成红色。口腔中脱落的组织细胞及个别白细胞被染成红色。其细胞质呈红色,细胞核呈深红色。第38页,共62页,星期日,2025年,2月5日实验四药物的微生物限度检查(四)病毒和细菌及其他病原微生物一、目的要求1、了解抗酸染色方法及各种病毒和细菌的菌落形态2、掌握药品的微生物学检验程序和方法二、实验内容1、药物的药物的微生物限度检查(四)1)将口服药物中的细菌分别接种:①蛋白胨水培养基;②葡萄糖蛋白胨水培养基;③枸橼酸盐(西蒙氏)培养基。同时接种产气杆菌于上述培养管做对照,以备进行IMViC试验。2)取接种在普通琼脂斜面培养基上面的外用药物中细菌进行血浆凝固酶检测,依据其反应结果,确定该菌的性质及名称。2、抗酸染色 3、真菌培养物的观察------黑曲霉、木霉、青霉菌菌落,白色念珠菌假菌丝,酵母菌菌落的观察。4、记录中草药、抗生素抑菌试验结果5、观察鸡胚的结构 第39页,共62页,星期日,2025年,2月5日---------------------------------------------------试验培养基加试剂试验结果大肠埃希菌产气杆菌蛋白胨水2管11葡萄糖蛋白胨水2管11葡萄糖蛋白胨水2管11枸橼酸盐2管11第40页,共62页,星期日,2025年,2月5日实验四药物的微生物限度检查(四)病毒和细菌及其他病原微生物取接种在普通琼脂斜面培养基上面的外用药物中细菌进行血浆凝固酶检测,依据其反应结果,确定该菌的性质及名称。 第41页,共62页,星期日,2025年,2月5日二.血浆凝固酶试验原理:非致病性葡萄球菌不产生血浆凝固酶而致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶,可使含有枸橼酸钠或肝素抗凝剂的兔或人等血浆发生凝固。方法:1.取洁净玻片,用记号笔画两个圈并标号,其中一个滴加生理盐水另一个滴加兔血浆。2.接种环烧灼灭菌后挑取金葡菌苔,1/2在生理盐水中研匀混悬,另1/2在兔血浆中研匀混悬,静止片刻,观察结果。结果:凝集呈颗粒状判定为血浆凝固酶试验(+),呈均匀混浊状不凝集判定为(-)第42页,共62页,星期日,2025年,2月5日方法:1.取洁净玻片,用记号笔画两个圈并标号,其中一个滴加生理盐水另一个滴加兔血浆。2.接种环烧灼灭菌后挑取金葡菌苔,1/2在生理盐水中研匀混悬,另1/2在兔血浆中研匀混悬,静止片刻,观察结果。结果:凝集呈颗粒状判定为血浆凝固酶试验(+),呈均匀混浊状不凝集判定为(-)第43页,共62页,星期日,2025年,2月5日制片(涂片、干燥、固定);石炭酸复红初染(加温、盖滤纸片)5min---水洗;3%盐酸酒精脱色(15S,水洗);美兰复染(1min,水洗)-滤纸吸干镜检。抗酸染色步骤第

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