血型鉴定抗体筛选交叉合血.ppt

关于血型鉴定抗体筛选交叉合血第1页，共37页，星期日，2025年，2月5日实验内容血型鉴定抗体筛选交叉配血第2页，共37页，星期日，2025年，2月5日血型鉴定第3页，共37页，星期日，2025年，2月5日目的掌握红细胞ABO血型及Rh血型鉴定第4页，共37页，星期日，2025年，2月5日原理ABO血型鉴定：根据红细胞上有无A抗原或（和）B抗原，以及血清中有无抗A及抗B，可以将血型分为A型、B型、AB型、O型四种，利用红细胞凝集实验通过正定型、反定型准确鉴定ABO血型。Rh血型鉴定：IgM型盐水抗D试剂能够与D阳性红细胞在盐水介质中形成肉眼可见的凝集。第5页，共37页，星期日，2025年，2月5日原理第6页，共37页，星期日，2025年，2月5日试剂抗A及抗B血清（商品试剂）5%A型和B型红细胞（试管法）10%A型和B型红细胞（玻片法）IgM型盐水抗D试剂标本抗凝静脉血EDTA-K2第7页，共37页，星期日，2025年，2月5日红细胞ABO血型鉴定（试管法正定型）标记两支干净的试管-A和-B在标记为-A的试管中加1滴抗A试剂。在标记为-B的试管中加1滴抗B试剂。在每个试管中各加入5%受检者红细胞悬液(1份压积红细胞+19份0.9%盐水)轻轻混匀，1000g离心1分钟。检查上清液是否有溶血。轻轻重悬细胞扣，检查凝集。第8页，共37页，星期日，2025年，2月5日红细胞ABO血型鉴定（试管法反定型）标记两支干净的试管Ac和Bc每管加入2滴受检者血清。在标记Ac的试管中加入1滴5%A型试剂红细胞。在标记Bc的试管中加入1滴5%B型试剂红细胞。轻轻混匀，1000g离心1分钟。检查上清有无溶血。轻轻重悬细胞扣，检查凝集。判断并记录结果。第9页，共37页，星期日，2025年，2月5日红细胞ABO血型鉴定（玻片法）在标记的玻板上分别加一滴抗A、抗B。各加一滴10%受检者红细胞悬液(1滴压积红细胞+9滴0.9%盐水)轻轻混匀，室温放置2-15分钟。观察并记录结果：凝集为阳性结果，不凝集为阴性结果，对结果有怀疑，应用试管法重新实验。第10页，共37页，星期日，2025年，2月5日红细胞Rh血型鉴定试管法标记一支75×12mm的试管加入抗D血清1滴，加1滴5%的待检细胞。轻轻混匀，1000g离心1分钟，或3000r/min，15秒。检查是否溶血，然后轻轻重悬细胞扣，检查凝集玻片法在玻板上标记待检红细胞编号。加入抗D血清1滴于标记玻片中。将35－45%的待检细胞1滴滴入玻片并混匀。室温放置2分钟左右观察结果。第11页，共37页，星期日，2025年，2月5日结果判读（ABO血型鉴定）正定型反定型血型抗A抗BA细胞B细胞O细胞--++-O+--+-A-++--B++---AB第12页，共37页，星期日，2025年，2月5日结果判读（Rh血型鉴定）阳性对照阴性对照待检细胞结果+-+++---第13页，共37页，星期日，2025年，2月5日报告方式XXX型，Rh+/-第14页，共37页，星期日，2025年，2月5日注意事项玻片、试管都要标记！！！A及B标准血清绝对不能相混,不要依靠用染料颜色标记血清。所用玻片、试管实验前必须清洗干净，以免出现假凝集现象。红细胞悬液滴管头不能接触标准血清液面，一般先加血清，再加红细胞悬液，便于核实是否漏加血清。离心时间、速度严格要求。要在光亮的背景下观察凝集,可使用光镜检查小的凝集,同时应注意观察凝集强度，有助于A、B亚型的发现，观察后立即记录。第15页，共37页，星期日，2025年，2月5日抗体筛选第16页，共37页，星期日，2025年，2月5日目的掌握抗体筛选的试验方法第17页，共37页，星期日，2025年，2月5日盐水试验法白蛋白介质法低离子强度介质法（LISS）酶技术抗球蛋白试验聚凝胺促凝技术PEG促凝技术第18页，共37页，星期日，2025年，2月5日原理抗人球蛋白法：IgG类抗体，由于其分子量小，与红细胞结合以后在盐水介质中不发生肉眼可见的凝集，称为不完全抗体。但在加入抗-IgG的抗体后，以其搭桥则可出现凝集。第19页，共37页，星期日，2025年，2月5日试剂抗球蛋白试剂阳性对照血清阴性对照血清O型红细胞生理盐水标本：抗凝静脉血（EDTA-K2）第