第三章 DNA的半保留复制课件.ppt

第三章DNA的半保留复制一、滚环形（rollingcircle）复制噬菌体（例?X174）/真核rDNA/细菌F因子第五节其他DNA复制方式1、概念：一种复制模式，复制叉沿环形模板复制一定次数，每个反应中新合成的链将前一反应中合成的链抛出，形成与环状模板链互补的一系列线性序列。第三章DNA的半保留复制3’-OH5’-P5’5’第三章DNA的半保留复制2、复制过程：1、复制起始于某一条DNA链上2、新生DNA链延伸，不断取代母链3、复制一圈，产生单位长度的线性DNA链4、若复制继续进行，5’不断甩出，可产生多单元线性DNA链3、复制方向：单向复制第三章DNA的半保留复制4、被取代链的命运：（1）按单位长度切割则产生单体，单体可继续转化为环形双链形式；（2）按多聚体长度切割则产生一系列由基本复制单位串联而成的各种形式(线形、双链环状等)第三章DNA的半保留复制二、D-环型（displacementloop）动物线粒体/植物叶绿体基因组DNA1、特点：（1）双链复制不同步（2）起始点异位（H链、L链各一）HL哺乳类D-loop：500-600bp线粒体：一个-多个D-环叶绿体：2个D-环第三章DNA的半保留复制2、复制过程（1）L链首先合成：在H链上的复制起点处开始合成，以D-环的形式取代原来的L链（2）L链片段的继续合成：D-环扩展（3）H链合成开始：当取代环达mtDNA的2/3时，L链上的复制起点暴露，H链开始合成（4）复制的完成：L链的合成提前完成，H链的合成随后结束第三章DNA的半保留复制三、末端型（stranddisplacement）复制线性基因组：腺病毒/噬菌体?291、特点：（1）末端起始，不需要合成RNA引物；（2）两条链不同步复制第三章DNA的半保留复制第三章DNA的半保留复制2、末端蛋白（TP）的作用（1）与DNA聚合酶结合（2）携带一个C作为引物第三章DNA的半保留复制3、复制过程PolC3’-OHC3’-OH3’5’第三章DNA的半保留复制3、复制过程：（1）起始末端蛋白(TP)与DNA聚合酶结合,并携带一个C作为引物（2）复制叉移动（3）复制达到末端时一条单链被置换出来（4）末端反向重复序列配对，形成双螺旋（5）以被置换的单链为模板合成DNA第三章DNA的半保留复制附：复制的真实性（1）DNA的半保留复制（2）遵守严格的碱基配对规律（3）DNA聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能（4）RNA引物的作用（5）复制出错时有即时的校对功能(3’5’外切酶功能）（6）DNA损伤的修复机制第三章DNA的半保留复制Question作业：名词解释半保留复制、半不连续复制、冈崎片段、前导链、滞后链、复制子、复制叉、复制泡、端粒酶、θ型复制、滚环复制简答题1、简述原核生物DNA复制起始的过程2、比较原核生物与真核生物DNA复制的差异3、保证DNA复制真实性的机制有哪些4、简述端粒、端粒酶的作用以及端粒DNA延长的机制第三章DNA的半保留复制思考题：“θ”型复制和滚环复制有哪些不同点？**PolIII仅以单链为底物PolIII聚合酶活力很强，是PolI的15倍*OriC：E.coli的复制起点*TheasymmetricdimermodelforDNAreplication.*tus(terminatorutilizationsubstance):tus位于terB上游10bp处，编码36kD蛋白，它和ter结合之后，解旋酶不能把两股DNA分开，从而停止复制。双向复制要求两方回合才能停止。但是，终止蛋白调节此项功能的细节不明。多个ter可能通过反复限制复制速度达到这一目的的。枯草杆菌中有和大肠杆菌ter序列和tus基因相似的基因及蛋白质。*Theplasmidsthatsurviveinyeast（byvirtueofpossessingARSandCENelements）arecirculaDNA