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职业教育医学生物技术专业教学资源库噬菌体转录噬菌体疗法概论
噬菌体转录噬菌体转录噬菌体发育的调控大多数是在转录水平。感染后立即转录的基因往往重构宿主,有利于噬菌体感染,一组延后的早/中期基因的转录直接指导噬菌体DNA复制,然后是晚期基因编码衣壳及相关蛋白。许多噬菌体编码一个或多个RNA聚合酶,帮助指导这个过程。其他则只需要宿主RNA聚合酶(RNApolymerase,RNAP)进行一系列修饰。
噬菌体调控一般作用在3个阶段(图1):转录起始、延伸和终止。对噬菌体转录调控的研究有助于认识细菌的转录。对于细菌,转录涉及多亚基核心酶(multi-subunitcoreenzyme),包括亚基b、b,两拷贝a。s亚基提供启动子识别和启动的特异性。s因子可以根据大小或者功能界定。噬菌体转录噬菌体转录
噬菌体转录图1噬菌体λ早期转录的调控噬菌体转录
起始过程中,聚合酶结合的因子与dsDNA分子上适当的启动子序列结合,形成闭合启动子复合体(closedpromotercomplex)。DNA需要解链,形成开放启动子复合体(openpromotercomplex)。噬菌体转录噬菌体转录
噬菌体转录有些强特异性启动子识别或者转录不需要额外的蛋白质。线粒体和真核病毒中,发现具有类似的RNA聚合酶。其起源和进化需要进一步研究。这些聚合酶与逆转录酶和DNA聚合酶家族的聚合酶I(A)家族相关。噬菌体转录
噬菌体转录图2N抗终止复合体组装模型(引自DasA,1992)箭头表示根据遗传和生化证据推测的蛋白质-蛋白质、蛋白质-RNA相互作用。N蛋白结合boxB环区nut位点的RNA转录物。NusA蛋白催化的反应中,结合RNA聚合酶复合体。蛋白质NusB,NusG以及核糖体蛋白S10结合boxA。与结合boxA的蛋白质相互作用可以稳定N:NusA:RNA聚合酶复合体。缺乏N蛋白,不能在t有效终止时,NusG与rho相互作用,使转录物短一些,直到发生抗终止作用。噬菌体转录
噬菌体转录噬菌体感染时,复制和转录在同一模板上以不同速率同时进行。复制一般是转录速率的10倍。转录的推进速度也很快。转录物只能在启动子处开始,大量不完整的转录物可能产生很多问题。T4复制体能够主动跨越正在转录的RNA聚合酶,朝任一方向推进,不会脱落,也不会明显变慢。一旦迎头碰撞,RNA聚合酶真正转移到新合成的链,而不是停留在原来的模板。滞后链在新冈崎片段合成前一直是单链。噬菌体转录
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