植物组织培养无病毒苗培养.pptVIP

康乃馨不同茎尖培养与康乃馨斑驳病毒的脱除情况(3)茎尖培养法脱除植物病毒的技术关键同一种病毒在不同植物体内分布部位不同。例：烟草花叶病毒(TMV)在如下植物中的荧光反应。烟草：l-4片叶原基中未见TMY特异荧光撞羽矮牵牛：一两片叶原基未见TMV特异荧光，而在三四片叶原茎中可见TMV荧光。番茄：1片叶原茎中未见TMV特异荧光。所以在用茎尖培养脱毒时，必须认真确定病毒在植物茎尖中的分布部位，然后确定培养茎尖的大小.撞羽矮牵牛：可取生长锥或带一两片叶原基C利用茎尖培养法脱除植物病毒时，最好找出茎原基所带叶原基的数目与生长点(茎尖)大小的相关性，这样在取材时就方便多了。F尖进行培养；B的茎尖进行培养；D烟草：可取带4片叶原基的茎尖进行培养。E番茄：只能取生长锥或仅带一片叶原基的茎A01茎原基带6片叶原基0.6~0.8mm茎原基0.05~0.08mm茎原基带2片叶原基0.1~0.2mm茎原基带4片叶原基0.3~0.4mm020304②不同病毒种类在同一种植物中分布部位不同。甘薯斑纹花叶病毒、缩叶花叶病毒：分布于1.0-2.0mm以内的茎尖中羽毛状花叶病毒：分布于以内茎尖中马铃薯马铃薯卷叶病毒、Y病毒：分布于以内的茎尖中；X病毒：分布于以内的茎尖G病毒：分布于以内的茎尖S病毒：0.2mm以下21植物各部位器官和组织培养去分化诱导产生愈伤组织，然后从愈伤组织再分化产生芽，长成小植株，可以得到无病毒苗。说明病毒颗粒会在愈伤组织的培养过程中逐渐消失。2.愈伤组织培养脱毒病毒在植物体内不同器官或同一器官的不同组织中分布不均匀，由那些无病毒细胞增殖产生的愈伤组织就是获得无病毒苗的基础。有些愈伤组织细胞中病毒浓度较低，在愈伤组织细胞快速分裂过程中，病毒的复制能力衰退或丢失。继代培养的愈伤组织容易产生抗性变异细胞，因而可能出现不带病毒的愈伤组织。但经愈伤组织产生无病毒苗的脱毒途径容易产生变异，可能导致植株丧失其原有的优良性状，当然也有可能产生有益的变异，但频率极低。可能的原因有：愈伤组织脱病毒的机理先将砧木种子进行表面消毒，以后再接到1%琼脂以MS无机盐培养基培养发芽，用苗龄约2周的幼嫩实生苗作砧木。把实生苗从试管中取出，在无菌条件下切去顶部，留下1-1.5cm的上胚轴部分，将子叶和腋芽除去，把根切短至4—6cm长。从田间或温室旺盛生长的成年树剪取一小段新梢，经消毒后在超净台上用显微操作法取出仅带1-3个叶原基的茎尖约1mm大小作穗用。采用倒T字形的水平切口。嫁接苗用液体滤纸桥培养基培养。成活率30%—50%，嫁接成功的植株移植到土壤之前至少要有两片展开的真叶。3.茎尖微体嫁接脱毒苹果微体嫁接茎尖大小与脱毒成功率苹果不同取材时期对微体嫁接成功率的影响试管微体嫁接在果树方面发展最快嫁接植物不受与珠心及有性实生苗相关的幼年阶段的影响。许多栽培品种通过嫁接繁殖了许多世代，因此果树研究者和种植者关于这些品种的自根苗的根冠大小、病虫害情况以及耐寒性等了解得很少。茎尖组织培养繁殖结合热处理可产生无病毒植物，因此，许多研究者认为对通常采用嫁接繁殖的果树进行试管嫁接是很适宜的。01试管微体嫁接除了可培育无病毒植株外，还可解决难以生根的园艺植物的生根问题和进行嫁接亲和力的研究。024.珠心胚培养脱毒柑桔类80%以上的种类具有多胚性,而单胚占的比例很小。01柑橘类植物中有不少多胚品种，一颗种子内除一个合子胚外，还有数个至数十个由珠心细胞形成的无性胚，称做珠心胚。02因为病毒通常是经维管束的韧皮组织传播的，而珠心与维管束系统无直接联系。由珠心组织诱导产生的植株就可免除病毒的危害。03它与合子胚不同，不是受精的产物，而是由体细胞产生的，因此具有和母体相同的遗传组成；与合子胚一样，在珠心胚和植株之间无维管组织连系，因此即使母体植株感染了病毒，珠心胚也是无毒的；在自然条件下，珠心胚一般都不能发育成熟，只有适时从种子中剥离出来，接种在人工培养基上，珠心胚才能长成植株，而这些植株应当是不带病毒的母体无性系。珠心胚具有3个特征0102花药培养的最初目的，是培育起源于花药内部花粉粒的单倍体植株，并使单倍体加倍，作为育种材料的来源。但经大量实验表明花药培养所得的植株有95%以上是能开花结果的多倍体，而且生长发育都优于母株。已证明，经愈伤组织培养出来的花药植株是不带病毒的，借此方法，不仅可快速培育出大量的无毒植株，并可省去病毒鉴定工作，对基层生产应用实为一举两得的事情。5.花药培养脱毒0102第一种