软骨鱼类物种鉴定技术规范.docx

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SN/T5666—2024

软骨鱼类物种鉴定技术规范

1范围

本文件规定了软骨鱼物种的形态学和基因条形码鉴定技术，及其制品的软骨鱼成分基因条形码鉴定技术。

本文件适用于软骨鱼物种的鉴定，以及软骨鱼制品成分的鉴定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款，其中，住日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测

GB/T35918动物制品中动物源性检测基因条码技术Sanger测序法

LY/T2501野生动物及其产品的物种鉴定规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

软骨鱼纲chondrichthyes

内骨骼为软骨的鱼类，包括全头亚纲和板鳃亚纲。体被盾鳞，想裂4对~7对，多直接开口于体表。尾常为歪型尾，无师，肠内具定瓣。雄性具有鳍脚，体内受精。

3.2

全头亚纲holocephali

软骨鱼纲中的亚纲。体常光滑，无鳞，胸绪宽大，尾鳍细长，雄性具交接器。鳃裂4对，外被一膜状鳃盖，后具一总鳃孔。背鳍硬棘能竖垂。雄性除具绪脚外，还具1对腹前鳍脚和1个额鳍脚。尾歪形、圆形或线形。

3.3

板鲲亚纲elasmobranchii

软骨鱼纲中的亚纲。体长形，披盾鳞。鳃隔发达呈板状。鳃裂5对一7对，各自单独开口于身体表面，无鳃盖褶。背鳍上的硬棘不能自由竖立。口位于头部吻的腹面，宽大面横裂大多数眼后有喷水孔1个。皮肤鳍条为角质鳍条，歪尾形，不具螵。体被盾鳞。含盆形总目和蝠形总目。

3.4

濒危物种endangeredspecies

列入《濒危野生动植物物种国际贸易公约》附录以及国家和地方重点保护名录的物种。3.5

盾鳞placoidscale

软骨鱼类所特有的鳞片，由棘突和基板两部分组成，呈对角线排列。

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3.6

鳃(裂)孔gillslits

鱼类咽部两侧一系列成对的裂缝，直接与外界相通。3.7

歪形尾heterocercaltail

脊柱尾端向上弯，尾鳍上下两叶不对称，上叶狭小下叶宽大。3.8

鳍脚clasper

软骨鱼类雄性交配器官。多位于腹鳍内侧，是一对棒状结构，内有软骨支持。注，个别种类还具有腹前鳍脚或额鳍脚。

3.9

鳍fin

鱼类体上的外部器官，内有附肢骨骼支持，通常分布在躯体和尾部上，是主要的运动和平衡身体的工具。

注：鳍一般可分为两类，一类是不成对的奇鳍，位于背部、尾部和肛门后，包括冒据、尾屹和臀鳍：另一类是左右成对

的锅鳍，位于体之两侧，包括胸蜡和腹鳍。

3.10

喷水孔spiracle

软骨鱼类和少数低等硬骨鱼类眼后具有喷水或吸水功能的孔。

3.11

DNA条形码DNAbarcode

一段短的能够高效鉴定物种的DNA标准区域3.12

Sanger测序法Sangersequencing

以单链或双链DNA为模板。在DNA聚合酶的催化下延伸结合在模板上的引物，直到掺人一种链终止核苷酸为止。每个反应合有四种dNTP,并混入用荧光标记的ddNTP.使廷长的寡聚核苷酸选择性终止，通过高分辨本变性百细管电泳分离片段获得碱基顺序的方法。

3.13

质量评分qualityvalue

仪器测序过程中，软件分析测序信号时，根据预测到的碱基解读错误率，给出针对每个碱基所对应的质量评分，用以评估单个碱基的测序原量。

3.14

不可信区域unreiablearea

测序结果序列两端QV值低而不作为结果分析的区域。3.15

序列相似度similarityofthesequences

反映序列间相似程度的数值。注：一般以百分数表示。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

BOLD:生物条形码数据系统(BarcodingofLifeDataSystem)

目标基因

引物名称

引物序列5-3

扩增片段长度

cO1

FISHCOILDC_ts

CACGACGTTGTAAAACGACTCAACYAATCAYAAAGATATYGGCAC

700bp左右

FISHCOIHBC_ts

GGATAACAATTTCACACAGGACTTCYGGGTGRCCRAARAATCA

测序引物

M13F(-29

CACGACGTTGTAAAACGAC

MI3R

GGATAACAATTTCACACAGG

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6设备

6.1解剖刀、解剖剪、解剖针、解剖镊。

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