生物技术概论：生物技术与人类健康.ppt

艾滋病疫苗的研究主要是通过克隆病毒外膜蛋白和gp160及gp120基因后在不同的表达系统中表达，以获得基因工程疫苗。目前该疫苗大多处于临床试验阶段,尚未大规模使用。电子显镜下的HIV小儿麻痹症疫苗小儿麻痹症是由脊髓灰质炎病毒引起的中枢神经系统疾病。通过基因工程方法改变脊髓灰质炎病毒的基因结构，获得弱化了的脊髓灰质炎病毒，用它研制成了小儿麻痹口服疫苗。通过基因工程方法制得脊髓灰质炎病毒衣壳蛋白VP1、VP2和VP3作为注射疫苗。3）他病毒性疾病疫苗流感疫苗流感病毒极易发生变异,能逃避抗体的作用。所以长期未有有效的疫苗面市。1993年Ulmer首先将流感病毒高度保守的NP基因插入质粒中制成核酸疫苗免疫小鼠，并取得了令人满意的效果。流感病毒狂犬病疫苗狂犬病疫苗是继天花之后，人类最早应用的第二个疫苗。狂犬病疫苗经历了脑组织细胞培养、基因工程、合成肽及抗独特型抗体疫苗等几个发展阶段。最近又发展了动物实验效果较好且更为安全的金丝雀痘病毒活疫苗。狂犬病毒疱疹病毒疫苗EB（Epstein-Barr）病毒是5种疱疹病毒之一。在非洲，这种病毒主要侵染B淋巴细胞引起波克梯氏淋巴瘤，在地中海地区及包括我国在内的亚洲地区则主要浸染口、咽上皮细胞引起鼻咽癌。现在已成功地构建EB病毒膜抗原的重组痘苗病毒，以及中国仓鼠表达系统，并完成了成人、儿童和幼儿的免疫观察。将多种病原体的相关抗原融合在一起，产生一种带有多种病原体抗原的融合蛋白。将多种病原体相关抗原克隆在同一个载体（多价表达载体）上。美国于1986年10月首先研制了一种含有疱疹病毒、肝炎病毒和流感病毒的疫苗。4）基因工程多价疫苗霍乱疫苗接种已有100多年的历史，传统疫苗是采用肌肉注射的灭活或减毒霍乱弧菌菌体苗。效果不佳，副作用大，已被WHO宣布不再推荐此疫苗的应用。霍乱弧菌疫苗1.4细菌性疾病的疫苗根据霍乱弧菌的致病机理，科学家们利用基因工程技术研制了重组B亚单位疫苗，是已被WHO推荐应用的疫苗。我国军事医学科学院生物工程研究所经过十多年的研究研制出了国家一类新药rBS-WC口服霍乱疫苗，并已上市。1976年起利用犰狳研制麻风疫苗。美国Young和Whitehead生物医学研究所和麻省理工学院生物学系等单位合作，将麻风杆菌的DNA片段重组到大肠杆菌的β-半乳糖苷酶基因上，将这种融合基因再重组到λgt11载体中，由此获得了β-半乳糖苷酶和麻风杆菌基因编码的蛋白质的融合蛋白。Bloom等人则将麻风杆菌的基因克隆到活的卡介苗中制备成多价疫苗。麻风杆菌疫苗幽门螺杆菌的灭活全细胞或经超声波破碎后的无细胞提取物均具有一定的免疫原性。1995年Lee等人报道用HP的尿素酶及大肠杆菌不耐热肠毒素为佐剂免疫小鼠，可产生保护性抗体。幽门螺杆菌疫苗目前疟原虫的基因工程疫苗有抗子孢子疫苗，如CSP蛋白质；抗裂殖子疫苗；抗配子母细胞疫苗等。1.5寄生虫病疫苗疟原虫疫苗血吸虫疫苗血吸虫基因工程疫苗主要有两大类：一类是虫体蛋白质，如28kDa蛋白和25kDa蛋白的基因工程疫苗就具有良好的抗原性；另一类是酶性抗原，如谷胱甘肽S-巯基转移酶（GST）、3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、磷酸葡萄糖同分异构酶（TPI）等候选抗原。DNA疫苗是利用克隆于载体上的抗原基因直接注射机体（包括皮下、皮内或肌肉等）、口服、鼻内滴注、鼻腔喷雾接种等方式，被细胞摄取并在细胞内表达相应的抗原，通过不同途径诱导机体的特异免疫应答。DNA疫苗的最大优点易于制备、便于保存、基因在细胞的持续表达可达到持续免疫的效果并且易于制成多联多价疫苗。缺点是DNA是否会整合到染色体上而引起严重的后果，是否会引起免疫病理作用，如诱发自身抗核抗体，是否会产生免疫耐受等问题仍有待研究与观察。1.6DNA疫苗所谓治疗性疫苗是指有别于传统的对传染病有预防作用的疫苗，而是指具有积极治疗意义的一类新型疫苗。预防性疫苗主要针对健康的人群，目的是预防，所以其普遍性、安全性和有效性是非常重要的，因此靶抗原主要以病原体或其自身的组成成分为主；而治疗性疫苗则是针对少数感染或患病个体，目的是治疗，因此它注重的是个体的病理学特殊性，针对性较强，靶位的选择趋于特殊性。1.7治疗性疫苗非特异性疫苗是指具有增强肌体免疫系统的活性的疫苗。如病毒性疾病（如丙型肝炎、乙型肝炎、艾滋病等）的治疗性疫苗以及肿瘤疫苗。特异性疫苗则是指用于治疗某一特定疾病的疫苗。如自身免疫性疾病疫苗，如多角性硬化病、系统性红斑狼疮等；心血管疾病疫苗，如动脉粥样硬化和高血压；认知性疾病，如朊病毒疾病、亨廷顿舞蹈病、阿尔茨海默病等。2.1