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药包材微生物检验

微生物得特点

个体小，面积大：小于0、1mm。肉眼不可见。

分布广，种类多(10万多种):自然界中到处都有，如水、空气、土壤等，土壤中得数量最多。

代谢强，转化快：发酵乳糖得细菌在1小时内可分解其自重1000～10000倍得乳糖；产朊假丝酵母合成蛋白质得能力比食用公牛强10万倍。

生长旺，繁殖快：微生物有惊人得繁殖速度，大多数微生物几十分钟内就可以繁殖一代。

适应性强，易变异(耐药性产生得原因)。

酵母菌(芽痕)

弧状菌

葡萄球菌

大肠杆菌

棒状杆菌

链球菌

菌落单位

菌落单位---CFU:由单个菌细胞或几个同种菌细胞在培养基上长成肉眼可见得菌落，每个菌落就就是1CFU

细菌菌落霉菌菌落

包材得微生物污染

包材微生物污染：微生物得产生、附着而给

包材及生产环境带来不良影响。

污染包材得细菌：常见污染包材得细菌就是

一些生命力较强得细菌，如：葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌及一些霉菌，抵抗力弱得细菌一般不易造成污染。

包材得微生物污染源：空气、水、厂房与设

备、生产用原辅料、包装材料、生产操作人员等

微生物检验

●一、实验准备

●二、培养基得制备

●三、人流、物流程序

●四、检验步骤方法

●五、培养观察与结果判断

实验准备

●洁净室得启用

微生物限度检查应在环境洁净度10000级下得局部洁净度100级得单向流空气区域内进行。在检验开始前，应确保：

a、洁净室房间、台面等已清洁消毒

b、洁净室已臭氧灭菌不少于半小时

C、洁净室净化空调系统持续运转不少于1小时，紫外灯已开启

d、洁净室中有压差要求得房间压差达到规定

●实验器材、消耗品得准备

a、无菌衣、手套、口罩、试管、瓶子、培养皿、消毒剂配制缸、脱脂棉花球

b、一次性薄膜过滤滤器、微生物检查薄膜过滤仪C、消毒剂、酒精灯

培养基得制备

培养基就是微生物试验得基础，直接影响微生物试验结果。培养基得制备就是检验得重要一环。

培养基制备过程中得注意事项

培养基得水化

①培养基水化使用得容器应就是玻璃器皿或搪瓷器皿如三角烧瓶。蒸馏水洗净，烘干后方可使用。不得用铜锅或铁锅，以防有离子混入培养基中，影响微生物得生长；

①配制培养基最常用得溶剂就是纯化水，不能含有任何可能抑制或影响微生物生长得物质；

培养基得溶解

在培养基分装灭菌前，应溶解均匀，使用电炉等设备煮沸培养基时，应用小火加热，并边加热边搅拌，避免培养基焦化或爆沸溢出。

培养基得灭菌

①已配制好得培养基必须立即灭菌

①湿热灭菌必须严格控制灭菌温度和时间(121度，15-30分钟，20分钟)

培养基制备过程中得注意事项

培养基得保温

①培养基灭菌后应立即取出，不得储藏在高压灭菌器中，避免造成过度灭菌，影响培养基得营养成分或选择性效果。建议用45℃—55℃水浴锅保温不得超过8小时(60℃得培养箱，温度不同，长时间高温影响培养基质量)。

培养基得贮藏

①配制好得培养基应保存在避光得环境。一般在三周内使用(琼脂培养基不得在0℃或0℃以下存放，防止冷冻破坏凝胶特性)。

0固体培养基灭菌后得再融化应在加热得水浴中或采用流通蒸汽进行，只允许一次，不得再灭菌。

大家应该也有点累了，稍作休息

大家有疑问的，可以询问和交流

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人流、物流程序

3物流

将样品、灭菌后得物品、集菌过滤器等转移入传递窗内，打开传递窗内得紫外灯，照射不少于0、5小时。

人流

●检验人员在物品紫外消毒即将结束时，开始进入洁净室。在更衣室脱去外衣和鞋。清洗双手后，在物品柜内取口罩和手套，戴上口罩。打开灭菌后得无菌衣外包装，取出无菌衣，穿戴整齐，要求严格覆盖头发、胡须和颈部。打开手套外包装，取出手套戴上，无菌衣袖口应包裹在手套内。

●用更衣室内得消毒剂浸泡双手后，自然挥干。进入缓冲走廊，关闭传递窗内得紫外灯后，打开传递窗得门，取出样品和其她实验物品，经二级缓冲，进入操作间。

●开启超净工作台工作电源，关闭紫外灯，并用75%得酒精喷洒擦拭消毒工作台面。

检验步骤方法

检验方法：平皿法、薄膜过滤法

药品检验三种方法，包材检验两种方法得选用仅与最后结果得报告有关，不影响检测得准确性。以铝箔为例，若无菌生长，薄膜法结果为1cfu/100cm²,平皿法结果为30cfu/100cm²。薄膜法费时费力，但目前标准要求。

检验过程(以常用得薄膜过滤法为例)

·药典要求：采用薄膜过滤法，滤膜孔径应不大于0、45um,直径一般为50mm。

●经过多次反复实验，发现采用75mm滤膜，菌落计数更方便、清晰。

金葡菌在75MM薄膜