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补体结合试验特异性和敏感性均较凝集试验高,是慢性布氏杆菌病一种可靠的诊断方法,已作为世界各国清除病畜的必要手段。规定1:10被检血清阻止溶血在50%以上,即为阳性反应。因补体结合反应的操作方法复杂,只在特殊情况下才应用。第31页,共57页,星期日,2025年,2月5日(三)变态反应检查变态反应现象一般在感染后的20~25d出现,因此不宜作早期诊断。本法适合于动物的大群检疫,主要用于绵羊和山羊,其次为猪。检测时,将布氏杆菌水解素0.2ml注射于羊尾根皱襞部或猪耳根部皮内,24及48h后各观察反应一次。若注射部发生红肿,即判为阳性反应。此法对慢性病例的检出率较高。第32页,共57页,星期日,2025年,2月5日四、免疫防治我国目前用的疫苗:M5弱毒活菌苗可用于牛、羊和鹿布病的预防。皮下注射或气雾免疫。免疫期羊1年半,牛、鹿各为1年。M90弱毒活菌苗同M5弱毒活菌苗。S2弱毒活菌苗可用于猪、羊、牛等动物,甚至可以接种怀孕动物而不引起流产。免疫方法采用饮水、气雾和皮下注射3种。免疫期猪为1年,牛和羊均为2年。第33页,共57页,星期日,2025年,2月5日第二节伯克氏菌属(Burkholderia)是新建立的一个属,该属成员来自假单胞菌属Ⅱ群,现有30多种细菌,对人畜致病的主要有鼻疽伯克氏菌及伪鼻疽伯克氏菌。第34页,共57页,星期日,2025年,2月5日一、鼻疽伯克氏菌(B.mallei)鼻疽伯克氏菌,原名鼻疽假单胞菌,惯称鼻疽杆菌,为马、骡、驴等单蹄兽鼻疽病的病原体,也能感染人及其他家畜和多种野生动物。此病可呈急性或慢性经过,病变特征为皮肤、鼻腔粘膜、肺脏及其他实质器官形成典型的鼻疽结节和溃疡。第35页,共57页,星期日,2025年,2月5日(一)形态及染色G-中等大小杆菌,无芽孢、无荚膜、不运动。单独散在。美蓝染色可见异染颗粒,是本菌的形态特征。第36页,共57页,星期日,2025年,2月5日(二)生长要求及培养特性生长要求专性需氧,普通培养基中生长缓慢,加入适量甘油、血红蛋白、血液、血清或葡萄糖可促进生长,适温37℃,最适pH为6.4~6.8。第37页,共57页,星期日,2025年,2月5日培养特性甘油肉汤均匀浑浊生长,并逐渐形成灰白色粘稠沉淀,10~15d后液面形成灰白色菌环或菌膜。甘油琼脂24~48h后,形成灰白色至灰黄色中等大小菌落,直径2-3mm。马铃薯琼脂斜面:48h后,可出现棕黄色蜂蜜样的粘稠菌苔,随着时间的延长色泽逐渐变深。第38页,共57页,星期日,2025年,2月5日(三)致病性本菌在自然条件下主要感染马、骡、驴等单蹄兽,引起鼻疽病。骆驼、犬、猫等家畜以及狮、虎、豹、狼、狐、貂等野兽也可感染。牛、猪、绵羊、山羊及禽类不感染。人类偶尔也可经创伤或吸入含菌材料而受感染,并引起致死性疾病。第39页,共57页,星期日,2025年,2月5日实验动物猫和仓鼠最易感,豚鼠次之。接种细菌于雄性豚鼠腹腔后可引起典型的睾丸炎,睾丸肿胀化脓而后破溃,此反应称为:Strauss反应,具有一定诊断价值。Strauss反应第40页,共57页,星期日,2025年,2月5日关于革兰氏阴性需氧杆菌第1页,共57页,星期日,2025年,2月5日重要的革兰氏阴性需氧杆菌布氏杆菌属伯克氏菌属假单胞菌属波氏菌属弗朗西斯菌属第2页,共57页,星期日,2025年,2月5日第一节布氏杆菌属(Brucella)布氏杆菌是多种动物和人布氏杆菌病的病原。该菌不仅危害畜牧生产,而且严重损害人类健康,因此在医学或兽医学领域都极为重视。第3页,共57页,星期日,2025年,2月5日一、主要生物学特性(一)形态及染色球杆状或短杆状,长0.6~1.5μm,多单在。不形成芽孢和荚膜,无鞭毛不运动。革兰氏染色阴性。柯氏染色法布氏杆菌呈红色,其他菌呈绿色或蓝色。第4页,共57页,星期日,2025年,2月5日布氏杆菌第5页,共57页,星期日,2025年,2月5日(二)生长要求与培养特性生长要求初代分离营养要求较高,培养基中常需加入血清、血液、肝汤、葡萄糖或泛酸钙和赤藓醇等。需氧,适温37℃,最适pH6.6~7.4。流产布氏杆菌和绵羊布氏杆菌初代分离时尚需5%~10%CO2环境。第6页,共57页,星期日,2025年,2月5日培养特性初次分离时生长缓慢,需5~10d甚至20~30d才能长出菌落,但实验室传代保存的菌株,培养48~72h即可生长良好。肝汤肉汤呈轻微浑浊生长,无菌膜。但培养日久,可形成菌环。血清肝汤琼脂形成无色透明、隆起、光滑、湿润、有光泽、边缘整齐
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