植物组织的培养.ppt

****一、导言通过必修课的学习，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？植物组织培养：大幅度提高无性繁殖效率营养繁殖扦插嫁接压条扦插嫁接压条二、植物组织培养技术在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织或细胞，在适宜的培养条件下诱导其产生愈伤组织、丛芽和完整植株的技术。1.植物组织培养植物细胞具有全能性的原因：植物细胞具有全能性。生物体的每个细胞都携带着一套来自受精卵的完整基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。全能性大小的比较受精卵＞生殖细胞体细胞体细胞中：幼嫩组织细胞（芽尖）＞成熟组织细胞2.植物组织培养的原理是什么？5.植物组织培养的影响因素细胞分裂素类：赤霉素类：赤霉酸（GA3）生长素类：植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。常用的植物激素：01激动素（KT）、、玉米素（ZT）6－苄氨基嘌呤（6－BA）2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）02②此外生长素和细胞分裂素的浓度和使用的先后顺序以及温度（18－22℃）、空气、无菌环境、适合的PH（5.8左右）、适时光照（每日用日光灯照射12h）等。生长素/细胞分裂素高：利于根的形成适中：有利于愈伤组织分化低：有利于芽的形成6.植物组织培养的基本过程:离体的植物器官、组织、细胞脱分化愈伤组织再分化根芽植物体营养、激素等营养、激素等脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。外殖体：从活植物体上切下进行培养的那部分组织、器官或细胞。再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新诱导根、芽等器官的分化，这个过程叫再分化。愈伤组织:具有分裂能力、排列疏松而无规则，是高度液泡化而无定形状态的薄壁细胞。试管苗：在植物组织培养基中由愈伤组织诱导形成的植物幼苗，叫试管苗相关概念:植物组织培养过程示意图上面的示意图中还有什么地方不够完善的？没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。2.植物组织培养的过程技术措施（1）植物组织培养时为什么在无菌条件下进行？由离体的植物器官、组织或细胞形成愈伤组织必须在无菌条件下进行。只有在这样的条件下，才能保证培养出的细胞是正常细胞，否则培养基内许多其他微生物与离体细胞争夺营养与生存空间，难以形成愈伤组织。（2）在培养过程中为什么要转换培养基？（3）为什么愈伤组织一般先诱导分化产生芽，然后再诱导分化产生根？诱导离体的细胞、组织和器官的脱分形成愈伤组织、再分化形成芽和根所需条件特别是植物激素的条件不同，所以，在培养过程中针对不同的阶段任务，有时需要转换培养基。如果先诱导生根就很难再诱导生芽。快速繁殖、培育无病毒植物可以通过大规模的植物细胞培养来生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂。如：紫草愈伤组织中提取紫草素，能治疗烫伤、割伤以及作为染料和化妆品的原料。培育农作物新品种转基因植物的培养3214三、植物组织培养的应用注意：奈乙酸用少量0.1mol/LNaOH溶液溶解,苄基腺嘌呤用少量0.1mol/LHCL溶解100ml三角瓶或大口培养瓶2.镊子3.超净台灭菌锅5.封口膜和橡皮圈6.有棉球的广口瓶酒精灯8.三角漏斗9.培养皿设备及用品MS培养基(用于配置发芽和生根培养基并灭菌)材料四、天竺葵的组织培养制备MS培养基步骤（1）配置各种母液①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量（2）配置培养基①配制培养基（固体）②调PH③培养基的分装分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml由于天竺葵的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素（3）灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌2.外植体的消毒接种（无菌操作）思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。.生根培养培养（1）愈伤组织的培养接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒。培养温度控制在18-22℃，并且每日用日光灯光照12小时。(2)试管苗的培养.生芽培养****