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基因工程(geneticengineering):又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学当代方法为伎俩,将不一样起源基因按预先设计蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有遗传特征、取得新品种、生产新产品。;第1节基因工程基本原理和技术;二、基因工程操作技术(工具);限制性内切酶;不一样酶识别序列不一样;;限制性内切酶作用过程;什么叫黏性末端?;GAATTC;CCCGGG
GGGCCC;当前已发觉4000各种限制酶,主要存在于微生物中。;;DNA连接酶──“分子缝合针”;;;CTTAA;;;各种与DNA相关酶;要让一个从甲生物细胞内取出来基因(目标基因)在乙生物体内进行表示,首先得将这个基因送到乙生物细胞内去!;“分子运输车”;作为载体没有切割
位点将怎样?;①能自由进出细胞(分子比较小)。
②载体必需是安全——不会对受体细胞有害。
③有多个限制性内切位点——供外源DNA片段(基因)插入。
④能自我复制——方便在受体细胞中大量复制并保留下来。
⑤有遗传标识基因——筛选出含重组DNA受体细胞。;;惯用载体:质粒;DNA重组技术基本工具;例、所用激素过去主要是从动物内脏中提取,数量有限,现大多采取基因工程方法生产(如图所表示)。
①d为。
②取得f,必须先用切割b和d,使它们产生相同黏性末端,再加入适量方可形成。
③b名称是,其化学本质为。;小结;在基因工程中,切割运载体和含有目标基因DNA片段,需使用()
A.同种限制酶B.两种限制酶
C.同种连接酶D.两种连接酶
;以下说法正确是()
A、全部限制酶只能识别一个特定核苷酸序列
B、质粒是基因工程中唯一运载体
C、运载体必须具备条件之一是:含有多个限制酶切点,方便与外源基因连接
D、DNA连接酶使黏性末段碱基之间形成氢键;例1、下列关于限制酶和DNA连接酶了解正确是
A、其化学本质都是蛋白质
B、DNA连接酶能够恢复DNA中氢键
C、在基因工程操作中能够用DNA聚合酶
代替DNA连接酶
D、他们不能被重复利用
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