微生物在药学中的应用省公开课一等奖全国示范课微课金奖课件.pptx

第四篇

微生物在药学中应用;抗生素（antibiotics）;分类;（2）按作用对象;医疗用抗生素特点;抗生素传统分离方法;抗生素生产工艺过程;第8页;1、菌种－保藏品种经复壮后备用

2、孢子制备－?固体培养基上大量培养孢子

3、种子制备－取得菌丝供发酵之用。

4、发酵

（1）接种量10%左右，周期4-5天；

（2）培养基—糖类，淀粉，花生饼粉，黄豆饼粉，玉米浆，蛋白胨；

（3）补料工艺—延长抗生素分泌期，增加产量；

（4）前体—如Pen发酵前体为苯乙酸或苯乙胺等；

（5）pH

（6）温度：夹套或蛇管冷却水散热（渗漏时易造成染菌，喷淋冷却也一样）;（7）通气搅拌：机械搅拌；挡板防涡流

（8）消泡沫：?玉米油、豆油、泡敌—聚氧乙烯氧丙烯甘油0.01-0.02%

（9）消毒灭菌，预防杂菌污染

菌种、空气、培养基、管道设备、防噬菌体。

（10）放罐时间： 菌丝浓度、形态、残糖、氨基氮、pO2、pH、效价。

5、发酵液预处理

（1）发酵液中含Ca2+、Mg2+、Fe3+、Protein等杂质；

（2）Ca2++草酸→草酸钙↓（还可促进蛋白质沉淀）

（3）磷酸盐除Mg2+

（4）黄血盐除Fe3+

（5）ZnSO4与黄血盐形成复盐吸附蛋白质

（6）过滤;6、抗生素提取和精制

（1）溶媒萃取法—Pen

（2）离子交换法—氨基糖苷类抗生素

（3）吸附法（活性炭、大孔吸附树脂）—头孢菌素

（4）沉淀法——四环素

7、成品检定和包装;抗药性（drugresistance）p305;抗菌药品发展史也就是细菌对其耐药性发展史;（一）、抗药性产生遗传机制

1、自发突变与药品选择

（1）由敏感菌遗传物质自发突变产生。

（2）药品选择结果是杀死敏感菌，耐药菌富集。

2、细胞间抗药性基因转移

染色体上耐药基因—经过接合、转化、转导和转座子而转移。

质粒上耐药基因—自行复制，代代相传，并在不一样种属间转移（性菌毛接合作用）;（二）、抗药性产生生化机制

;耐药性和青霉素酶测定;抗生素效价单位及效价测定法p308;抗生素效价;抗生素效价单位;二、抗生素效价测定—管碟法;第二十章药品体外抗菌试验

抗生素体外抑菌试验

MIC——最低抑菌浓度

MBC——最低杀菌浓度

;药品???外抗菌试验;第二十一章

药品制剂微生物学检验;灭菌制剂：

注射剂

眼科制剂

手术用具（敷料、缝合线、无菌器具等）;普通药品无菌检验——直接接种法

需氧菌、厌氧菌、霉菌检验

需氧菌：30~35℃，7天

厌氧菌：30~35℃，7天

霉菌：20~25℃，7天

观察培养液是否混浊或涂片染色镜检;阳性对照—（24h有菌生长）

金黄色葡萄球菌CMCC（B）26003

生孢梭状芽胞杆菌CMCC（B）64941

白色念珠菌CMCC（F）98001;二、特殊药品无菌检验法

1、油类药品

用吐温培养基

2、抗菌药品或含防腐剂药品

适宜培养基

?????青霉素—加入青霉素酶

磺胺药—对氨基苯甲酸培养基（可使菌合成叶酸，不被干扰）

培养基稀释药品至不抑制微生物生长??????

薄膜过滤法;结果判定：

阳性对照长菌

阴性对照不长菌

样品不长菌

——无菌检验合格;第二节非灭菌制剂微生物程度检验;一、细菌总数测定(琼脂倾注平皿计数)

1阴性平板不长菌

2细菌37℃培养24~48h

3细菌总数结果汇报方式

（1）高、低稀释度菌落数在30~300以内，计算比值；

（2）比值≤2，以高稀释度平均值为准；

（3）比值2，以低稀释度为准。;二、霉菌（酵母）总数测定

虎红培养基，25~28℃，48~72h，5~50个菌落;三、控制菌（质控菌）检验

1口服药—不能检出沙门氏菌、大肠杆菌

2外用药、眼科制剂—不能检出金葡菌、绿脓杆菌、破伤风梭菌。;质控菌检测方法;四、活螨检验

用放大镜检验节肢动物螨虫是否存在