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生物芯片技术;了解生物芯片功效,及其医学研究领域中作用,以及生物芯片技术必威体育精装版进展。
熟悉生物芯片种类及其作用,基因芯片、蛋白芯片和微缩芯片试验室原理及其制备方法。
掌握基因芯片工作原理、制备方法及其在临床诊疗中意义。;第一节生物芯片概述
第二节基因芯片
第三节蛋白芯片
第四节芯片试验室;第一节生物芯片概述;一、生物芯片定义;二、生物芯片特点;生物芯片分类;三、生物芯片在医学中应用;第二节基因芯片;基因芯片(genechip)又称DNA芯片(DNAchip)或DNA微阵列(DNAmicro-array)。基因是载有生物体遗传信息基本单位,存在于细胞染色体上。将大量基因片段有序地、高密度地排列在玻璃片或纤维膜等载体上,称之为基因芯片。;基因芯片发展历史;一、基因芯片原理;基因芯片研制总体蓝图;图11-1基因芯片技术主要步骤;二、基因芯片技术;2.探针在载体表面固定
固相载体
固体片状:主要有玻片、硅片和瓷片等;
薄膜状:有硝酸纤维素膜、尼龙膜以及聚丙烯膜等。;探针在载体表面固定可分为两大类方法:
合成后点样,多用于大片段DNA,有时也用于寡核苷酸,甚至mRNA。
原位合成(即在支持物表面原位合成寡核苷酸探针),适合用于寡核苷酸。;合成后点样;Cartesian-PixSysSeries;合成后点样板-CartesianTech.;
原位合成有三种路径:
原位光刻合成
压电打印法
分子印章原位合成法。;原位光刻合成技术原理示意图;压电打印原位合成法工作方式;(二)样品制备;(三)杂交反应;(四)信号检测和分析;基因芯片杂交结果要用专用扫描系统读取。;基因芯片扫描结果;GENERALSCANNING-ScanArraySystem
;三、基因芯片应用;表示谱芯片实例;(五)在疾病诊疗应用
(1)感染性疾病诊疗
性传输疾病、肝炎等。
(2)遗传性疾病诊疗
地中海贫血、婚前检验等。
(3)耐药性检测
结核分支杆菌耐药性检测芯片等。;生物芯片优、缺点;生物芯片于普通分子杂交比较;存在问题;基因芯片技术本身有一些关键问题亟待处理:
(1)基因芯片特异性提升
(2)样品制备和标识操作简化
(3)增加信号检测灵敏度
(4)高度集成化样品制备、基因扩增、核酸标识
及检测仪器研制和开发。;第三节蛋白芯片
;蛋白质芯片(proteinchip),又称蛋白质微阵列(proteinmicroarray),是用于蛋白质功效研究及相互作用分析生物芯片,采取原位合成、机械点样或共价结合等方法将多肽、蛋白、酶、抗原、抗体固定于硅片、玻璃片、塑料片、凝胶、尼龙膜等固相介质上形成生物分子点阵。;蛋白芯片原理与分类;蛋白质芯片特点;蛋白质芯片分类;二、蛋白质芯片制作和检测基本流程;制备抗体文库
选择固相载体片基
制备探针蛋白质,点样
制备待检样品(蛋白质、多肽、酶等)
对样品进行标识
与芯片进行抗原抗体反应
检测分析;;蛋白质相互作用
发觉新疾病标志物作为临床诊疗指标
对疾病病理分子机制研究
筛选药品靶,发觉新药品,研究药理学;第四节芯片试验室;芯片试验室是将样品制备、生化反应和检测分析全过程集约化,并缩微到一张芯片上自动完成,形成所谓微型全分析系统(micrototalanalysissysten,μ-TAS),或称“缩微芯片试验室”(lab-on-a-chip)。;一、缩微芯片试验室特点;二、缩微芯片试验室基本组成;三、缩微芯片试验室应用研究;缩微芯片试验室应用新进展;在意大利,研究人员利用微机电系统技术开发出一个芯片试验室原型,这种芯片有非常优异热特征,是分析DNA理想工具,如聚合物连锁反应。在瑞典,研究人员开发出一个纳米试验室,能在1小时内同时处理480种蛋白质样本。
芯片试验室另一应用是制成一次性用具,如检验卡等,能够用于医院,也能够作为消费者用具,用途很广泛,市场潜力巨大。
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