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肿瘤组织库的建立与管理
研究目的
探讨分子生物学研究中肿瘤库的建库条件,标本的采集、保存和质量控制,以及肿瘤库的信息化管理等有关问题,创立肿瘤组织标本库,保护和合理利用肿瘤的标本资源,为临床和科学研究人员,提供适宜数量的肿瘤标本促进肿瘤的研究。
目录
建库理论根底
材料与方法
结果
讨论
致谢
理论根底
一、建立组织库的三种模式
1.“银行〞模式
2.临床试验模式
3.前瞻性收集模式
理论根底
“银行〞模式的组织库:按照一定的标准化运转程序〔standardoperatingprocesseds,SOPs〕标准人体组织的收集、加工和储存。
组织标本形式:通常为低温冷冻组织或蜡块。
缺点:不能提供新鲜的、未被冰冻的人体组织,亦不能提供某些有特殊加工需求的组织样本。不能满足研究者对组织块的个性化需求。
优点:可向研究者提供大量的组织样本,并且这些组织均有相关的临床信息和流行病学信息。
理论根底
理论根底
前瞻性收集模式:研究者指定需要的组织类型,同时也制定出所需的组织采集、处理及储存方法。
缺点:没有现成的大量的组织标本以及临床资料,因为组织需要前瞻性的去收集。
优点:研究者能获得他们需要的组织样本,能够满足其研究的个性化需求。
理论根底
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理论根底
4.季加孚.北京大学临床肿瘤学院肿瘤标本库的建设[J].北京大学学报:医学版,2005,37(3):329—330.
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材料与方法
库房
生物样本库资源信息管理系统
主要设备
BRADY条码打印机
海尔-80℃冰箱
患者入院后行生物平安性检查。检测HIV以及嗜肝病毒HBV及HCV感染情况。HIV感染患者不列为采集对象。HBV及HCV感染者需在标本上明确注明。
尊重患者的知情权和隐私权,在向患者及家属介绍标本采集和使用目的,获得患者自愿签署知情同意书后,方可安排标本采集和数据录入。
组织采集
1、取血液标本,每例采集10ml〔不少于5ml〕,约10ml全血平均分装于红帽管〔不含抗凝剂,1管〕和紫帽管〔含2%EDTA抗凝剂,2管〕中。
2、红帽管用于别离血清,室温放置30分钟后离心;紫帽管用于别离血浆及淋巴细胞。
3、1500r/min离心10分钟,此时悬液分层,上层淡黄色为血清〔红帽管〕或血浆〔紫帽管〕,底层为红细胞,紫帽管中中层呈灰白色的为外周血淋巴细胞。
4、轻轻吸取淡黄色上层血清〔血浆〕放入1.5ml离心管中,每管200µl,共12管〔血清6管,血浆6管〕,做好标记。
5、新鲜抗凝血〔含2%EDTA抗凝〕去血浆后,按照1:1比例参加PBS液混匀。
6、15ml离心管内先参加3ml淋巴细胞别离液,后参加6ml稀释样品,注意参加样品要缓慢进行,不要冲破液面,影响离心效果。20±2℃下2000r/min离心20分钟。
7、离心后血样分四层,将移液管插入液面,轻吸灰白色的淋巴细胞层,放入另一15ml离心管中,注意吸取过程中防止吸入分层液和血浆。
8、按1:5的比例向淋巴细胞中参加PBS液,混匀洗涤,室温1000r/min离心10min。
9、弃去上清液保存底部沉淀,适用1.5mlPBS液吹打洗涤,置入标记好的1.5ml细胞冻存管中,高速离心机500r
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