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22第七章植物离体繁殖植物离体繁殖:利用组织培养技术对外植体进行离体培养,短期内获得遗传性一致的大量再生植株。也叫快繁或微繁(propagationinvitro.Micropropagation)。和传统方法突出特点:1、繁殖效率高:增值率高,生长速度快,可周年生产,在一个短暂的时间,由单一个体开始,能产生出大量的遗传组成相同的植株。2、培养条件可控性强:人为提供培养基及小气候,便于对环境进行控制,省去田间栽培繁杂劳动。3、便于管理、占地面积小:30m2可存放1万多培养瓶,约10万多苗木。4、利于种质资源的保存及交换。快速繁殖的应用(1)短期内获得大量形状优良、整齐一致的种苗群体。加快引进新种、新育良种的繁殖,促进优良品种推广和应用。(2)大量繁育原来常规方法不能进行无性繁殖、难繁殖和繁殖速度慢的一些植物,尤其对一些珍、稀、濒危的植物的繁殖有更重要的意义。(3)作为培育新品种的有效手段,繁殖和保存育种材料。如远缘杂种、多倍体、突变体。(4)通过茎尖培养等技术脱毒,扩增脱毒苗,达到提纯复壮良种的目的。第一节植物快繁的器官形成方式由于植物种类不同,器官再生及快速繁殖的方式也不同。1、短枝发生型:外植体为带叶单芽茎段,培养为完整植株。特点:一次成苗,培养过程简单,容易移栽成活,遗传形状稳定,如葡萄、红薯等试管苗繁殖。2、器官型(Organtype):外植体带有顶芽或腋芽。培养后形成丛生芽,转入生根培养基,诱导生根成苗,扩大繁殖。特点:由单芽到丛芽,繁殖速度快,遗传形状稳定,多数花卉、苗木的快繁属于次类。3、器官发生型(Organogenesis):直接由外植体上或从愈伤组织产生不定芽,经过脱分化与再分化成苗。特点:繁殖速度快,有由愈伤组织再生植株,遗传不稳定。烟草、水稻、小麦、番茄等。4、胚胎发生型(Embryogenesis):外植体脱分化产生愈伤组织或细胞团,再分化为胚状体产生小植株。一般胚状体发生经过:球形期、心形期、鱼雷期、子叶期。特点:发生数量大,速度快,结构完整,人工种子繁殖,遗传变异。原球茎发生型(Protocorm):兰科。茎尖或腋芽外植体通过形成原球茎,而发育为完整植株。唐菖蒲第二节植物快繁的程序和关键技术离体无性繁殖的程序包括:1、无菌母株的制备初代培养:在无菌条件下,制备无菌繁殖的材料称为无菌母株,或繁殖母株(stockplant)。培养基激素配比,取材的年龄、大小和生理状态。初代培养的启动生长方式:腋芽被刺激后生长;茎段、叶片、其它器官伤口处产生不定芽;外植体切口产生愈伤组织。此阶段一般需要4-6周。茎尖培养茎段培养茎尖培养分化补血草的快速繁殖2、继代芽的增殖无菌母株再次切割继代培养,芽分化增殖成丛芽,加快繁殖速度。在快速繁殖过程中,随培养时间和继代次数增加,芽分化和生长速率降低,称为驯化现象,与内源激素和恒定培养条件有关,故可以调节激素配比或变温处理,提高繁殖速度。3、芽苗生根培养诱导无根苗生根的方法有两种:1)试管内生根:将无菌小枝条转入生根培养基中进行培养。生根培养基中的营养元素含量往往降低、需要适当提高生长素类物质(NAA,IBA)的浓度,降低细胞分裂素的浓度。降低无机盐和有机物含量,如一般1/2MS或1/4MS培养基。2)试管外生根:有些植物可以将离体条件下形成的枝条,在基部切口处用生根粉或与滑石粉混合的IBA涂抹,然后种植到温室或田间中。这样的方法可大大降低成本。试管苗:恒温、高湿、弱光、无菌、充足的营养。自然条件下,变温、低湿、强光、有菌、缺乏营养。移栽前后培养条件发生改变:01根系结构不完善:不生根(木本植物)、根与芽的输导组织不相通(愈伤组织)、再生根的吸收功能差。叶部结构不完善:缺少角质层或蜡质层,保水性差;缺乏叶表皮毛,保湿、反光性差;气孔开度过大,关闭能力差;叶片中栅栏组织发育不完善,光合能力低。移栽后植株死亡的原因:024、再生植株的锻炼和移栽C、克服这些因素的方法:要在培养瓶中培育壮苗、开瓶后要练苗。壮苗的措施:培养基中加入适宜的生长延缓剂(多效唑、矮壮素、B9等)。练苗的措施:1)日光锻炼:恢复、提高叶片的光合作用的能力,使小苗由异养向自养过渡。2)湿度锻炼:移栽前,开瓶练苗,使小苗逐步
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