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埃塞俄比亚芥SOD基因家族鉴定及BcaSOD1耐受镉胁迫功能验证分析.pdf

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目录

摘要I

AbstractIV

缩略词表VIII

1前言1

1.1镉污染对植物的危害1

1.2Cd污染对动物的危害3

1.3植物修复重金属污染的机理4

1.4埃塞俄比亚芥研究进展6

1.5SOD功能研究进展7

1.6研究目的和意义8

2埃塞俄比亚芥SOD基因家族鉴定及分析9

2.1实验材料与方法9

2.1.1实验材料9

2.1.2实验试剂9

2.1.4埃芥SOD基因系统发育树及染色体定位10

2.1.5埃芥SOD基因家族的基因结构和保守motif10

2.1.6埃芥SOD基因家族的顺式作用元件分析11

2.1.7埃芥SOD基因家族的共线性分析11

2.1.8埃芥根和地上部分总RNA的提取及cDNA的合成11

2.1.9Cd胁迫下BcaFSDs的表达量分析12

2.2结果与分析13

2.2.1埃芥SOD基因家族成员13

2.2.3埃芥SOD基因家族结构与保守基序分析16

2.2.4埃芥SOD基因家族顺式作用元件组成17

2.2.5埃芥SOD基因家族共线性分析18

2.2.6Cd胁迫下BcaFSDs的表达量分析21

2.3本章小结23

3埃芥BcaSOD1基因的功能分析24

3.1实验材料24

3.1.1植物材料及生长条件错误!未定义书签。

3.1.2实验试剂25

3.2实验方法25

3.2.1埃芥RNA提取与cDNA第一条链的合成25

3.2.2埃芥BcaSOD1基因的克隆25

3.2.3BcaSOD1亚细胞定位26

3.2.4埃芥过表达BcaSOD1植物载体的构建29

3.2.5大肠杆菌转化30

3.2.6质粒提取31

3.2.7农杆菌转化31

3.2.8拟南芥的遗传转化31

3.2.9过表达BcaSOD1基因拟南芥的鉴定31

3.2.10qRT-PCR筛选转基因拟南芥32

3.2.11Cd33

重金属胁迫转基因拟南芥表型分析

3.2.12Cd33

转基因拟南芥含量分析

3.2.13BcaSOD1诱导重金属解毒基因的表达33

3.2.14转基因拟南芥生理生化指标分析33

3.2.15RNA-seq41

转录组测序()分析

3.3结果与分析41

3.3.1BcaSOD1基因克隆41

3.3.2BcaSOD1的亚细胞定位42

3.3.3BcaSOD1基因拟南芥植株的鉴定与分析44

3.3.4qRT-PCR筛选转基因拟南芥46

3.3.5Cd胁迫下转基因植株的表型观察47

3.3.6Cd49

转基因拟南芥含量分析

3.3.7BcaSOD1诱导重金属解毒基因的表达49

3.3.8BcaSOD1通过提高转基因拟南芥的生理指标活性来增强

Cd50

其对的耐受性

3.3.9BcaSOD1调控参与精氨酸生物合成基因的表达53

4讨论与展望57

4.1埃芥SOD

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