第八章薄层色谱法课件.pptx

第八章薄层色谱法

第一节薄层色谱法原理第二节薄层色谱法操作技术第三节薄层色谱法的应用目录第八章薄层色谱法

重点难点第八章薄层色谱法掌握薄层色谱法的基本原理、操作技术及定性方法熟悉吸附剂与展开剂的选择原则了解薄层色谱法的应用

薄层色谱法原理第一节第八章薄层色谱法

第一节薄层色谱法基本原理（1）薄层色谱法将固定相（吸附剂）涂布于玻璃板成一均匀薄层，点样，（密闭的容器中）展开，斑点显色，（与对照品）比较进行分析。（2）薄层色谱法特点①试样预处理简单，对试样限制少；②载样量比较大，适用于制备；③仪器简单，操作方便；④分离能力较强；⑤灵敏度较高；⑥展开时间短。（3）薄层色谱法分类按照分离机制不同，分为吸附薄层色谱法、分配薄层色谱法、分子排阻色谱法等。①吸附薄层色谱法是以吸附剂为固定相。利用被分离组分对固定相表面活性吸附中心吸附能力的差别而实现分离。②分配薄层色谱法是利用被分离组分在固定相和流动相中分配系数的差别，或溶解度的差别而实现分离。1.薄层色谱法的特点及分类

第一节薄层色谱法基本原理在薄层色谱法中，常用比移值Rf来表示各组分在色谱中的保留行为。比移值是指溶质移动距离与流动相移动距离之比。 2.薄层色谱法的定性参数 Rf值与组分及色谱条件有关。色谱条件一定，Rf值只与组分性质有关，是薄层色谱法基本定性参数。Rf值在0～1之间，可用范围为0.2～0.8。例如，组分A的比移值，Rf=a/cRf测量示意图

第一节薄层色谱法基本原理（1）吸附薄层色谱法是以吸附剂硅胶等为固定相的薄层色谱法，是利用被分离组分对固定相表面活性吸附中心的吸附能力的差别来实现分离。（2）色谱过程3.吸附薄层色谱法薄层色谱过程示意图

（１）吸附剂的种类最常用的吸附剂有硅胶、氧化铝，它们的吸附性能好，适用于多种化合物的分离。例如，硅胶呈弱酸性，适合酸性和中性物质的分离，如有机酸酚类、醛类等；可在105～110℃加热30分钟活化，提高吸附活性；常用硅胶型号有：硅胶H、硅胶G、硅胶GF254等。吸附剂的吸附活性与含水量有关。4.吸附剂的选择第一节薄层色谱法原理硅胶和氧化铝的活度与含水量的关系硅胶含水量（%）氧化铝含水量（%）活度级吸附活性00Ⅰ大53Ⅱ156Ⅲ2510Ⅳ3815Ⅴ小

（２）吸附剂的选择原则主要考虑被分离物质的性质和吸附剂的吸附能力两方面因素。一般，被分离物质极性强，则选择吸附能力弱的吸附剂；被分离物质极性弱，则选择吸附能力强的吸附剂。4.吸附剂的选择第一节薄层色谱法原理

展开剂的选择是薄层色谱分离成功的重要条件之一。一般是根据被分离组分的极性、展开剂的极性和吸附剂的活性来选择展开剂。从右图中可见，圆中的三角形A角指向极性，则B角指向活性小的吸附剂，C角则指向极性展开剂，以此类推。5.展开剂的选择第一节薄层色谱法原理薄层色谱条件选择示意图

薄层色谱法操作技术第二节第八章薄层色谱法

硬板的制备方法将1份固定相和3份水（或加黏合剂的水溶液）在研钵中向同一方向研磨混合，去除表面的气泡后，研磨至浓度均一、色泽洁白的胶状物。倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.2～0.3mm），取下涂好薄层的玻板，置水平台上于室温下自然晾干后，置烘箱中在105～110℃活化0.5～1小时后，置于干燥器中冷却至室温备用。薄层板表面应均匀、平整、光滑、无麻点、无气泡、无损坏等。一、薄层色谱法操作技术第二节薄层色谱法操作技术研钵薄层板1.制板

（1）划基线点样前先用铅笔在距薄层板底边1～1.5cm（高效薄层板距底边0.8～1.0cm）处轻轻划出基线，并在基线上作好点样记号。（2）点样用点样工具轻触基线上点样记号呈圆形，直径以2～4mm为宜，注意不要损伤薄层表面。宜分次点样，每次点样后，待溶剂挥干后再点。（3）样点间距在同一薄层板需点多个样品时，样品点间距离不小于1.5cm为宜，点样不能距边太近