植物组织培养第三章植物器官和组织培养.pptVIP

AEDBC器官和组织培养基本程序植物营养器官培养植物组织培养植物繁殖器官培养本章内容提要：什么是器官培养？是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养技术分为：营养器官和繁殖器官培养。包括:根、茎、叶、花、果实、种子。什么是组织培养（即狭义的）？包括分生组织、表皮组织、薄壁组织等及产生的愈伤组织的培养概念第一节器官和组织培养基本程序包括以下几方面：无菌外植体的获得初代培养物的建立形态发生和植株再生培养物的观察记录。茎尖、茎段、叶片的灭菌根、块茎、鳞茎的灭菌（灭菌较困难）茎尖、茎段及叶片等的消毒：用清洁剂清洗75%酒精浸泡10-20min无菌水洗2-3次或Naclo或升汞泡10-15min无菌水洗3-4次自来水冲洗纯酒精漂洗升汞浸5-10min或2%Naclo液浸10-15min无菌水洗3次，待用。一、无菌外植体的获得01020304花蕾的灭菌果实、种子的灭菌自来水冲洗70%酒精浸泡数秒钟无菌水洗2-3次漂白粉上清液浸10min无菌水洗2-3次，待用。果实和种子的消毒：自来水冲洗10-30min70%酒精漂洗2%Naclo液浸10min无菌水2-3次取出种子培养，待用。01无菌环境03环境要清洁。02外植体处理：表面灭菌+抗生素04无菌的范畴：经过高温灼烧或蒸煮过后的物体，或经其它物理的或化学灭菌方法处理过后的物体，是无菌的。用于无菌操作的器械采用灼烧灭菌05二、初代培养物的建立无菌操作规范操作条件合适培养基种类、激素种类与浓度、其他附加物、外植体类型等要合适。体细胞胚外植体愈伤组织植株具根茎器官器官分化单极器官先茎后根先根后茎三、形态发生和植株再生根诱导率（%）愈伤组织诱导率（%）胚状体的诱导率（%）芽的诱导率——芽分化率（%）产生愈伤组织的外植体数/外植体总数产生芽的外植体数/外植体总数发根芽数/培养芽数产生胚状体的外植体数/外植体总数四、培养物的观察记录01是以根为外植体进行的离体培养02根无性系的建立03根的直接增殖04根的数量增加，形成主根与侧根之分05根的间接增殖06愈伤组织植株再生07根的形成过程08以不定根的方式进行根段培养第二节植物营养器官培养2、影响离体根发生和生长的因素a培养基的种类多采用MS，?MS，B5，White等基本培养基b生长调节剂多使用NAAIBAc植物材料同植物、不同基因型、不同部位、不同年龄d培养方式固体、固—液培养基e光照和温度fpH茎段培养指不带芽和带1个以上定芽或不定芽。01包括：块茎、球茎在内的幼茎切段的无菌培养。02主要目的：快繁；其次也可探讨茎细胞的生理特点，以及进行育种上的筛选突变体的过程。03优点：培养技术简单易行，繁殖速度较快；芽生芽方式增殖的苗木质量好，且无病，性状均一；解决不能用种子繁殖的无性繁殖植物的快速繁殖问题等。04二、植物茎段培养植物的茎茎段培养过程健康植株上选健壮的枝梢去叶片用自来水冲洗再生1%次氯酸钠0.1%升汞75%酒精1分钟MS培养基茎段培养在适当条件下可能形成：01单苗02丛生芽03愈伤组织04完整植物05茎段能否增殖受到以下情况影响：06生长素/分裂素的比值07高有形成愈伤组织的趋势08低易形成丛生芽09月季花茎段培养蝴蝶兰腋芽萌发以叶器官为外植体进行的离体培养。01叶器官包括：叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、叶肉、子叶。02再生成植株的方式：03直接诱导形成芽，04先诱导形成愈伤组织，再经愈伤组织分化成植株。05三、叶培养1．叶形椭圆形扇形心形叶的器官培养外植体消毒：幼嫩叶片冲洗干净用70％酒精10s饱和漂白粉液浸3～15min（或在0．1％L汞中浸3-5min）无菌水冲洗3～4次