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《猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞免疫检测技术规范(MHC-肽四聚体)(征求意见稿)》编制说明.pdf

《猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞免疫检测技术规范(MHC-肽四聚体)(征求意见稿)》编制说明.pdf

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江苏省地方标准《猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞免疫检测

技术规范(MHC-肽四聚体)》编制说明

一、项目背景

猪繁殖与呼吸综合征(porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS)

是影响猪繁殖和呼吸障碍的免疫抑制性疾病,是当前危害养猪业最重要的基础性

传染病。有研究表明,PRRSV感染后能够诱发机体产生体液和细胞免疫应答,

其中细胞兔疫在机体清除PRRSV感染方面起着更为重要的作用。细胞毒性T淋

CTLs

巴细胞()是机体有效控制各种病毒感染的重要免疫细胞之一。受主要组

织相容性复合体(Majorhistocompatilitycomplex,MHC)I类分子限制性抗原的

特异性CTL反应是机体受到病毒感染时,控制病毒复制和扩散、清除病毒的主

要机制。细胞免疫是评估PRRSV疫苗免疫效力、猪群驯化效果的重要指标,对

PRRSV感染的早期诊断也具有重要的意义。当前尚缺乏客观量化的PRRS细胞

免疫评价技术以及操作规程标准。

MHC-肽四聚体技术(简称pMHC-Tetramer)是检测病原体或肿瘤等特异性T

细胞的一种具有重要应用价值的技术。四个MHC-肽复合物(pMHC)通过生物

素蛋白连接酶(Biotin-proteinligaseA,BirA)-链酶亲和素(Streptavidin,SA)系

pMHC-TetramerMHC-TTcellreceptor,

统组装成,显著增强肽复合物与细胞受体(

TCR)的结合力,借助流式细胞技术检测,具有高灵敏性和高特异性(图1)。

本文件中以猪群优势等位基因型和病毒保守抗原表位肽建立检测PRRSV特异性

T细胞的技术,用于评价细胞免疫功能,适用于PRRSV疫苗免疫效力评价、猪群

驯化效果评估和病毒感染的早期诊断。2024年8月,江苏立华牧业股份有限公司

牵头,联合江苏省农业科学院和立华南京农业产业研究院有限公司完成《猪繁殖

MHC-

与呼吸综合征病毒细胞免疫检测技术规范(肽四聚体)》标准草案,同时

向省质监局提交江苏省地方标准项目申请。

1

图1:MHC肽四聚体组份示意图

引自/

二、项目来源

2024年8月,江苏省质量技术监督局下达立项文件《省市场监管局关于下

20242024143

达年度江苏省地方标准制修订计划的通知》(苏市监标〔〕号),

将《猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞免疫检测技术规范(MHC-肽四聚体)》列入

2024年度省地方标准项目计划,由江苏立华牧业股份有限公司、江苏省农业科

学院和立华南京农业产业研究院有限公司负责起草。

三、实施目的

制定江苏省地方标准《猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞免疫检测技术规范

MHC-PRRSVTPRRSV

(肽四聚体)》,提供特异性细胞的检测技术以评价诱

导的细胞免疫反应,为PRRSV疫苗免疫效力评价、猪群驯化效果评估和病毒感

染的早期诊断提供标准化的操作流程。

四、主要编制过程及主要技术内容确定依据

(一)编制过程

标准制定计划下达后,召开了标准起草组工作会议,组成了标准起草组,分

工开展文献查询、标准编制、意见征求、标准验证等各项标准制定工作。在完成

标准的各项调研、全部试验研究和验证工作后起草完成了征求意见稿。

(二)主要技术内容确定依据

猪繁殖与呼吸综合征是当前危害养猪业最重要的基础性传染病,造成巨大的

经济损失。PRRSV能够显著抑制猪的免疫防御系统,感染肺泡巨噬细胞(PAM)

和其他单核细胞,通过促降解的方式下调MHC分子的表达

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