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第八章薄层色谱法叶桦珍福建卫生97课件.pptx

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第八章薄层色谱法;教学目标;第二节基本原理;一、分离分析过程;二、定性参数

;

例:计算右图中中A、B、B三个斑点的Rf;(一)?固定相的种类

吸附剂、化学键合相、离子交换剂、色谱凝胶等

;

(二)固定相的选择

应根据试样的性质选择吸附剂的种类与活性。如试样为弱酸性,宜选择硅胶、酸性氧化铝或中性氧化铝作为吸附剂。若试样中的各组分无色且无荧光,可选择添加了无机荧光剂的硅胶。

一般而言,对极性小的试样,可选择吸附活性较强的吸附剂以保证对试样有足够的吸附力;对极性大的试样,宜选择活性较弱的吸附剂以免试样被牢牢吸附,造成Rf(比移值)过小。

;

(一)展开剂的种类?

1.单一展开剂对于成分简单的混合物,可用单一展开剂。

2.多元展开剂对于组分结构差异较小或极性接近的试样,通常采用多元溶剂(可从二元至六元)作展开剂以提高分离效果。;

(二)展开剂的选择方法

选择的依据是“相似相溶”原理,即极性大的组分选用极性大的展开剂分离,极性小的组分选用极性小的展开剂分离。

;第二节操作方法;薄层色谱法的一般操作流程为:

制板→加样→展开→斑点定位→结果分析

;

一、薄层板制备和处理

;2.制板过程

制板时除另有规定外,将1份固定相和3份水置于研钵中,按同一方向研磨混合均匀并去除气泡,倒入已放置好支持物的专用的涂布器中进行涂布。涂布完毕取下薄层板,置水平台上于室温下晾干后,在110℃烘30分钟以去除吸附剂所吸附的水分,冷置室温后随即使用或置于干燥箱或干燥器中保存备用。;;;;

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