化学发光免疫分析技术全解.pptVIP

化學发光免疫分析;;壹、化學发光免疫技术的概念;;化學发光免疫分析的优势;;;二、化學发光免疫分析基本原理;2.1免疫分析原理;2.2化學发光原理;;2.3化學发光免疫分析的原理;三、化學发光免疫分析的类型;用吖啶酯直接標识抗体(抗原)，与待测標本中對应的抗原(抗体)发生免疫反应後，形成固相包被抗体-待测抗原-吖啶酯標识抗体复合物，這時只需加入氧化剂（H2O2）和NaOH使成碱性环境，吖啶酯在不需要催化剂的状况下分解、发光。

由集光器和光電倍增管接受、记录單位時间内所产生的光子能，這部分光的积分与待测抗原的量成正比，可從原则曲线上计算出待测抗原的含量。;发光;磁微粒模式图;化學发光酶免疫分析（chemiluminescenceenzymeimmunoassay，CLEIA）是用参与催化某壹化學发光反应的酶如辣根過氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶(ALP)来標识抗原或抗体，在与待测標本中對应的抗原(抗体)发生免疫反应後，形成固相包被抗体-待测抗原-酶標识抗体复合物，經洗涤後，加入底物(发光剂)，酶催化和分解底物发光，由光量子阅讀系统接受，光電倍增管将光信号转变為電信号并加以放大，再把它們传送至计算机数据处理系统，计算出测定物的浓度。;该分析系统采用辣根過氧化物酶（HRP）標识抗体(或抗原)，在与反应体系中的待测標本和固相载体发生免疫反应後，形成固相包被抗体-待测抗原-酶（HRP）標识抗体复合物，這時加入鲁米诺发光剂、H2O2和化學发光增强剂使产生化學发光。;辣根過氧化物酶標识化學发光免疫分析示意图;该分析系统以碱性磷酸酶標识抗体(或抗原)，在与反应体系中的待测標本和固相载体发生免疫反应後，形成固相包被抗体-待测抗原-酶標识抗体复合物，這時加入AMPPD发光剂，碱性磷酸酶使AMPPD脱去磷酸根基团而发光。;碱性磷酸酶標识化學发光免疫分析示意图;分析环节;電化學发光免疫分析（electrochemiluminescenceimmunoassay，

ECLIA）是以電化學发光剂三联吡啶钌標识

抗体(抗原)，以三丙胺(TPA)為電子供体，

在電場中因電子转移而发生特异性化學发光

反应，它包括電化學和化學发光两個過程。;在電化學发光免疫分析系统中，磁性微粒為固相载体包被???体(抗原)，用三联吡啶钌標识抗体(抗原)，在反应体系内待测標本与對应的抗原(抗体)发生免疫反应後，形成磁性微粒包被抗体-待测抗原-三联吡啶钌標识抗体复合物，這時将上述复合物吸入流動室，同步引人TPA缓冲液。當磁性微粒流經電极表面時，被安装在電极下面的電磁铁吸引住，而未結合的標识抗体和標本被缓冲液冲走。与此同步電极加压，启動電化學发光反应，使三联吡啶钌和TPA在電极表面進行電子转移，产生電化學发光，光的强度与待测抗原的浓度成正比。;電化學发光免疫分析示意图;電化學发光免疫测定示意图;標识磁颗粒在電場中发光工作示意图;四、临床应用;五、发展与展望;