1.2.1微生物的基本培养技术课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

石家庄市第十五中学张姗姗1.2.1微生物的基本培养技术

新课导入向经过杀菌处理的牛奶中添加对人体有益的乳酸菌，再经过发酵就可以制成酸奶，在家里自制酸奶虽然方便，但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事件屡见不鲜，主要原因是在制作过程中有杂菌混入。思考：怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？应该先对制作用具和原料进行灭菌处理，再接种纯的菌种，并控制发酵条件，避免杂菌进入。

新课导入微生物结构简单、形体微小，眼睛看不到，若想得到纯净的微生物，就必须对其进行培养和分离。Q：在实验室培养微生物有哪些要求？①提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件②确保其他微生物无法混入③并将需要的微生物分离出来培养基无菌技术纯化培养研究和应用微生物的前提（发酵工程的重要基础）是：防止杂菌污染、获得纯净的微生物培养物。

一、培养基的配制培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。1.作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。2.类型：（1）按物理性质分液体培养基固体培养基有无凝固剂琼脂纯化（分离）、鉴定、活菌计数、保藏菌种扩大培养、工业生产微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。

一、培养基的配制2.类型：（2）按用途分选择培养基鉴别培养基（3）按化学性质分：天然培养基、合成培养基

一、培养基的配制3.成分：（1）基本成分：水、碳源、氮源、无机盐。②氮源：①碳源：提供碳元素的物质无机碳源：有机碳源：例如CO2、CO32-、HCO3-等提供氮元素的物质无机氮源：有机氮源：例如N2、NO3-、NH3、NH4＋等例如牛肉膏、蛋白胨、尿素等例如葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等自养微生物异养微生物Q1：为什么培养基需要氮源?氮源是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。

一、培养基的配制④水：③无机盐：调节酸碱平衡、维持一定的渗透压培养基常用：K2HPO4MgSO4NaClCa(NO3)2FeSO4良好的溶剂，参与细胞内的多项反应。3.成分：（1）基本成分：水、碳源、氮源、无机盐。1.同一种物质既可做作碳源又做氮源。2.培养基中营养物质的浓度及配比应恰当。浓度过低不能满足微生物生长需要；浓度过高会抑制微生物生长。注：

一、培养基的配制组分含量提供的主要营养牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸盐和维生素等蛋白胨10g氮源、碳源和维生素等NaCl5g无机盐H2O定容至1000mL水例：1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养组成Q3：是否培养所有微生物都需要有机碳源和有机氮源?Q2：上述培养基是固体培养基还是液体培养基?为什么？液体培养基不含凝固剂琼脂例：自养型微生物可利用无机碳源（如空气中的CO2）；自生固氮微生物可利用无机氮源（如空气中的N2）。不一定

一、培养基的配制3.成分：（2）特殊需求：培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。生长因子、氨基酸、维生素、碱基等拓展：各种微生物均有其生长繁殖的最适pH细菌为7.0~8.0，放线菌为7.5~8.5，酵母菌为3.8~6.0，霉菌为4.0~5.8。乳酸杆菌霉菌细菌厌氧微生物添加维生素pH调至酸性pH调至中性或弱碱性提供无氧环境

一、培养基的配制【现学现用】1.关于微生物的营养，下列说法正确的是A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外的无机物仅提供无机盐D.培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性D

二、无菌技术获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括两个方面：（1）实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。（2）培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。

二、无菌技术1.消毒使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。(1)概念：①煮沸消毒100℃煮沸5-6min适用范围：家庭餐具等生活用品63-65℃消毒30min或72-76℃处理15s或80-85℃处理10-15s②巴氏消毒适用范围：不耐高温的液体，如牛奶(2)常用方法：③化学药物用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等适用范围：生物活体、水源等紫外线照射30min④紫外线适用范围：接种室、接种箱、超净工作台等

二、无菌技术2.灭菌(1)概念：用强烈的理化方法杀死物体内外的所有的微生物，包括芽孢和孢子。①芽孢：有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成的一个椭圆形的休眠体(不是繁殖体)②孢子：对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力，环境适宜时又可萌发成细菌。细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖或休眠作用的生殖细胞。能直接长成新的个