核酸扩增技术分子生物学检验技术生物化学检验教研室82课件.pptx

分子生物学检验技术核酸扩增技术生物化学检验教研室

学习目标掌握：PCR技术的基本原理及反应体系；及PCR产物电泳检测方法。熟悉：PCR常见问题及体系优化；实时荧光定量RCR的原理。了解：PCR衍生技术；产物的其他检测方法；PCR方法标准化。

目录聚合酶链反应01PCR衍生技术02CONTENTS分子生物学检验技术CONTENTSPCR检测技术的临床应用03

PCR检测技术的临床应用PART03

PCR检测技术的临床应用01感染性疾病的诊断。02母婴传播的控制与观察。03遗传疾病的诊断。04肿瘤的诊断。05法医学鉴定。06早期诊断。07病情评估和预后判断。08抗病毒药物疗效的观察、指导。09新药验证。

一、感染性疾病病原体含量与病情之间的关系。01病原体含量与用药之间的关系。02药物及疗法的研究与开发。03新的病原体分子诊断标准。04新的愈后指标。05传染病发病的监控、预测与预防。06

HBV-DNA定量检测的临床意义01“两对半”：机体的免疫反应状态；FQ-PCR：检测的是HBV本身的遗传物质—DNA，是病毒存在和复制的最可靠、最直接的指标。02“携带者”、“大三阳”、“小三阳”等免疫学指标不能反应体内病毒复制水平与感染程度。

HBV-DNA定量与HBV复制水平及传染性。HBV-DNA定量与乙肝药物疗效。a.专家提出103copy/mL做为阴性或临床治愈标准;b.HBV-DNA定量分析与干扰素治疗（前、中、后）;c.拉咪呋啶。HBV-DNA定量与预后。a.含量高者急性肝炎患者易慢性化;b.癌变的几率明显高于含量低者。一、感染性疾病

常见性传播疾病病原体淋球菌（NGH）沙眼衣原体（CT）解脲脲原体（UU）梅毒螺旋体（TP）单纯庖疹病毒（HSV）乳头瘤病毒（HPV）人类免疫缺陷病毒（HIV）

淋球菌感染与致病人是淋球菌的唯一宿主。发病率最高，在所STD疾病中，高达60%左右。发病趋势：a.男性多于女性。b.城市走向农村;c.高收入阶层向低收入阶层扩展。人对淋球菌感染无天然抵抗力，免疫不持久，再感染和慢性患者普遍存在。如母亲为淋病患者，婴儿出生时易患上淋球菌性结膜炎。

沙眼衣原体感染与致病01严格的细胞内寄生。02不仅可致眼部感染、肺部感染、也是STD的主要病原体。03近年来在欧美等国，沙眼衣原体的感染率和危害性已超过淋球菌而居STD之首。04在我国，在非淋球菌性尿道炎中，居首位。05泌尿生殖道感染，妨碍妊娠。06盆腔感染，可致生殖能力损害。

解脲脲原体感染与致病合成尿素酶，分解尿素。在非淋球菌性尿道炎其感染率仅次于衣原体感染，居第二位。流产超过4次以上者，检出率高达80%。有30-40%男性尿道炎是由感染UU所致。与男性不育相关。男性不育患者精液中，脲原体检出率高达66.6％。检出率随精子数减少和精子活动力下降而升高。

荧光定量PCR诊断NGH/CT/UU的意义01非培养或形态学检查的诊断技术，快速、特异、敏感。02对无症状或症状轻者，可以早期确诊。03对NGH、CT、UU等混合感染者，诊断和鉴别诊断。04指导用药、考核疗效。

病毒实验室检测类型---病毒实验室诊断方法方法检测核酸检测病毒检测抗体/抗原ELISA/HI/PA蛋白印迹中和试验基因芯片病毒分离ELISA电镜免疫荧光RT-PCR实时荧光定量PCR

二、肿瘤癌胚抗原、同工酶、抗体、激素、细胞因子、受体等。肿瘤标志物包括癌基因抗癌基因、肿瘤转移基因及转移抑制基因。肿瘤相关基因表达的检测

三、遗传病等位基因检测。01多基因遗传病的突变检测。02基因表达异常所致遗传病检测。03

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