1.2.2 微生物的选择培养和计数 课件高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

第一章发酵工程第2节第2课时微生物的选择培养和计数【本节聚焦】1.怎样运用生物与环境相适应的观点来理解选择培养的原理?2.如何通过调整培养基的配方来有目的地培养某种微生物?3.测定微生物数量的常用方法有哪些?

课题背景自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。稀释涂布平板法呈现的杂菌群

一、选择培养基寻找耐高温的DNA聚合酶PCR是一种在体外DNA复制的技术，此项技术要求使用耐高温（930C）的DNA聚合酶。科学实例：1.筛选原因：水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。耐高温的酶耐高温生物体高温环境（热泉、火山口）寻找寻找2.筛选思路：美国黄石公园

一、选择培养基1.实验室中微生物筛选原理:2.选择培养基:在微生物学中，将允许_____________________，同时_____或_____其他种类微生物生长的培养基。类型条件分离得到的菌种营养不加碳源不加氮源石油是唯一碳源添加某种化学物质加入青霉素高浓度食盐改变培养条件零下低温耐低温的细菌酵母菌、霉菌等真菌金黄色葡萄球菌能分解石油的微生物自养型微生物固氮菌人为提供有利于______________的条件（包括_____、_____和_____等），同时____________其他微生物的生长。特定种类的微生物生长抑制阻止目的菌生长营养温度PH抑制或阻止

01【思考·讨论】尿素[CO(NH2)2]含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，NH3再转化成NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可作为细菌生长的氮源。选择培养基配方的设计CO(NH2)2+H2OCO2+2NH3NO3-NH4+脲酶转化被植物吸收尿素分子模型一、选择培养基

除以尿素作唯一氮源外，其他营养成分与普通培养基基本相同。1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？【思考·讨论】选择培养基配方的设计一、选择培养基培养基添加尿素作唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，才能生长发育繁殖。

牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g琼脂20.0g蒸馏水定容到1000mL培养基一KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g蒸馏水定容到1000mL培养基二1.从物理性质来讲，两者属于_____培养基，判断依据是__________________；该类培养基的主要用途为___________________________。2.从用途上来讲，____________属于选择培养基，目的是为了获得_____________________。3.两种培养基共有的培养基成分有：。培养基一的主要碳源为，主要氮源为；培养基二的碳源为，氮源为。固体添加了凝固剂琼脂分离、鉴定、计数、保存培养基二能分解尿素的微生物碳源、氮源、无机盐、水牛肉膏、蛋白胨牛肉膏、蛋白胨葡萄糖尿素[现学现用]

二、微生物的选择培养仅通过选择培养基可以知道1g土壤中有多少能分解尿素的细菌吗？分离：获得分解尿素的细菌的纯培养物计数：测定分解尿素的细菌的数量能利用平板划线法，进行微生物的培养计数吗？不能。平板划线法最开始的划线区域，细菌可能会长成一片，导致无法计数，此外灼烧接种环的时候也会杀死一部分细菌。方法:稀释涂布平板法

二、微生物的选择培养1.概念：将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，进行培养。2.步骤：（1）梯度稀释菌液（2）涂布平板

二、微生物的选择培养3.操作过程1×101mL1mL1mL1mL1mL1mL9mL无菌水90mL无菌水10g①铲取土样，将样品装入纸袋中。取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。②将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。1×1021×1031×1041×1051×1061×107(1)梯度稀释

二、微生物的选择培养③取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。