胚胎工程实验技术 (2).ppt

2、精子的获取采精：人工采集（假阴道法,手握法和电刺激等）保存：加入稀释液，低温保存精子的种类：睾丸精子，附睾精子，射出精子，雌性生殖道内的精子常用：射出精子和附睾精子第22页，共73页，星期日，2025年，2月5日第23页，共73页，星期日，2025年，2月5日3.卵子的成熟，精子的获能（1）卵子的成熟：由于从输卵管及卵巢中取出的卵子还未成熟，必须体外培养到减数第二次分裂中期才能进行受精作用（2）精子的获能方法：培养法：人工配制的获能液中培养（啮齿动物、家兔和猪等）化学法：一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，化学药物诱导（牛、羊等）第24页，共73页，星期日，2025年，2月5日获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在获能溶液或专用受精溶液中完成受精过程。4.体外受精第25页，共73页，星期日，2025年，2月5日四、胚胎的体外培养（胚胎工程的核心技术）1、概念：应用人工创造的环境，对获取的早期胚胎进行体外培养。2、培养起点：早期胚胎，而不是受精卵。3、目的：检查受精状况和受精卵发育能力第26页，共73页，星期日，2025年，2月5日4、培养液：培养不同发育时期的胚胎时，培养液的成分不同。5、移植：不同生物有不同的适宜阶段第27页，共73页，星期日，2025年，2月5日4、早期胚胎培养液成分:水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等.（两盐两素两酸及血清）第28页，共73页，星期日，2025年，2月5日胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。不同动物胚胎移植时间不同牛、羊：桑椹胚或囊胚阶段小鼠、家兔：卵裂期或囊胚阶段试管婴儿：8个或16个细胞阶段第29页，共73页，星期日，2025年，2月5日思考探究1、分析超数排卵技术关键是什么？（1）时间要求：一般要求在卵细胞具有旺盛受精能力之前冲取。（2）激素使用要求：使用促性腺激素，因为促性腺激素是蛋白质，所以只能注射而不能口服。2、思考从卵巢中采集的卵细胞为什么不能与精子直接受精？卵巢中卵细胞不成熟，需要培养到减数第二次分裂中期时才具有受精能力。3、根据试管动物操作过程，试管动物技术是克隆吗？不是。试管动物技术需要经过受精过程，属于有性生殖。而克隆技术是无性生殖。第30页，共73页，星期日，2025年，2月5日有性生殖无性生殖核移植技术、胚胎移植遵循不遵循体外受精胚胎移植试管动物克隆动物生殖方式技术手段遗传物质遗传规律比较试管动物和克隆动物来自2个个体主要来自核供体第31页，共73页，星期日，2025年，2月5日二胚胎移植技术胚胎移植（embryotransfer,ET）指从经济价值较高、遗传性状优良的母畜体内获取经激素处理超数排卵受精发育的胚胎，移植到同期发情的代孕母的子宫内，经过妊娠、产仔的技术。提供胚胎的个体称为------供体（donor）接受胚胎的个体称为------受体（recipient）第32页，共73页，星期日，2025年，2月5日本质生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程；胚胎移植第33页，共73页，星期日，2025年，2月5日（一）胚胎移植前的准备1、胚胎的采集1）采用超数排卵技术，以增加可用卵的数量2）利用体外授精技术培育胚胎。3）采集方法：手术法和非手术法。4）检出的胚胎必须在显微镜下观察，检查后完整的胚胎可移植到受体的子宫保存，整个过程迅速准确，并保持无菌操作。第34页，共73页，星期日，2025年，2月5日2、供体、受体动物的准备(1)选择供体：遗传性能和生产性能优秀的个体；受体：生产性能低，健康和正常繁殖能力的个体处理：同期发情具体做法：注射相关激素。第35页，共73页，星期日，2025年，2月5日供体的主要职能：只产生具有优良遗传特性的胚胎；受体的职能：繁重而漫长的妊娠和育仔的任务；第36页，共73页，星期日，2025年，2月5日（2）配种或人工授精精子来源：同种优良的雄性动物。第37页，共73页，星期日，2025年，2月5日（3）胚胎的收集在配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来。为什么在第7天进行冲卵？