药品微生物检验技术 课件 模块三 项目二 抗生素效价测定.pptx

《药品微生物检验技术》模块三药品有效性检查项目二抗生素效价测定

任务一庆大霉素溶液的制备任务二双碟的制备与加药培养任务三数据处理与结果判断目录

项目二抗生素效价测定任务一庆大霉素溶液的制备

任务引入请思考抗生素标准品的效价单位是明确标明的。配制标准品溶液时称量的标准品数量无法预先确定，如何根据标准品的称量数量计算出缓冲液的用量，配制出准确浓度的抗生素标准品溶液？某制药企业生产了一批硫酸庆大霉素片，为了知道这批硫酸庆大霉素片的抗菌效力，需要进行效价测定。用什么方法测定硫酸庆大霉素片的效价？效价测定对环境、操作员有什么要求？

任务分析本任务以庆大霉素标准品与供试品母液的配制为例，介绍抗生素效价测定缓冲液、供试品溶液和标准品溶液的配制，工作内容及要求见下表。工作内容工作要求关键点缓冲液的配制选择正确缓冲液、配制正确计算、称量、调剂pH、分装、灭菌供试品溶液的配制称量准确、稀释操作准确称量、溶解、定容、稀释标准品溶液的制备方法正确、完成制备称量、溶解、定容、稀释

相关知识-缓冲液的配制庆大霉素标准品所需缓冲液为pH值为7.8的无菌磷酸盐缓冲液，其成分与配制方法如下：取磷酸氢二钾5.59ｇ与磷酸二氢钾0.41ｇ，加水使成1000ｍＬ，滤过，在115℃灭菌30min。缓冲液的配制流程计算用量称量溶解分装灭菌磷酸氢二钾磷酸二氢钾

任务实施一、制订工作计划序号工作内容完成时间成员负责人1缓冲液的配制???2供试品溶液的配制???3标准品溶液的制备???根据任务要求，制定合理工作进度计划，并根据小组成员的特点进行分工。

任务实施二、试验前准备设备、器材、试剂规格数量用途高压蒸汽灭菌器??灭菌溶液电子天平、无菌药匙??称量试剂无菌烧杯、无菌玻璃棒、无菌研钵、无菌容量瓶、无菌移液管??溶解、稀释溶液无菌具塞容量瓶??分装溶液磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、蒸馏水??配制缓冲液庆大霉素片、庆大霉素标准品、无菌水??配制供试品、标准品无菌室、超净工作台、酒精灯、75%酒精??操作场所冰箱??保藏溶液补充1：???补充2：???

任务实施三、试验操作序号步骤操作内容1选器具高压蒸汽灭菌器、电子天平、1000mL烧杯、100mL无菌烧杯、无菌玻璃棒、无菌药匙、容量瓶2取试剂取磷酸氢二钾一瓶、磷酸二氢钾一瓶、蒸馏水3称量电子天平称量磷酸氢二钾___g与磷酸二氢钾____g于小烧杯中4溶解加水溶解，转移至大烧杯中，润洗___遍，加水使至____mL5分装将上述配制好的缓冲液分装至____只___mL容量瓶中，加塞，包扎6灭菌将包扎好的缓冲液放入高压蒸汽灭菌器中，___℃,灭菌___min7保藏取出灭菌好的缓冲液，放至于_____保藏待用无菌磷酸盐缓冲液的制备

任务实施三、试验操作记录供试品与标准品溶液的配制过程序号步骤操作内容1选器具电子天平、100mL无菌烧杯、无菌玻棒、无菌研钵、100mL无菌容量瓶、无菌移液管、无菌药匙2选药品庆大霉素片、庆大霉素标准品、无菌水3称量庆大霉素取___片庆大霉素片，称量每片的重量，计算平均片重为______将_____片药片放入无菌研钵中进行研磨，研细称取_____g药粉于____mL无菌烧杯中4缓冲液用量的计算庆大霉素片每mg的单位为________U，根据称取的庆大霉素粉末的量，缓冲液应为______mL5初溶导入容量瓶加入移液管取____mL无菌水至烧杯中，用无菌玻璃棒搅拌使药粉溶解，引流转移至____mL容量瓶中6洗烧杯合并洗液用定量的无菌水润洗烧杯____次，将润洗液转移至容量瓶中与初溶液合并7定容用上述计算的缓冲液的量，减去初溶与润洗烧杯的量，得出应加入的缓冲液的余量，将余量加入容量瓶即得8保藏将配置好的母液放于______中备用

任务测评序号考核内容考核标准配分得分1无菌磷酸盐缓冲液的制备正确计算并称量试剂10?正确配制缓冲液10?能完成缓冲液的灭菌操作5?正确保藏无菌缓冲液5?2供试品溶液的配制正确计算并称量药品10?正确操作药品的溶解与定容10?正确保藏供试品母液5?3标准品溶液的制备正确计算并称量标准品10?正确操作标准品的溶解与定容10?正确保藏标准品母液5?4清场能正确完成实训室的清场10?能正确完成无菌室的清洁10?合计100

项目二抗生素效价测定任务二双碟的制备与加药培养

任务引入请思考根据试验设计的不同，抗生素微生物检