药品微生物检验技术 课件 模块二 项目二 微生物总数检查 .pptx

《药品微生物检验技术》模块二药品安全性检查项目二微生物总数检查

任务一葡萄糖酸钙口服液的微生物总数检查-平皿法任务二葡萄糖酸钙口服液的微生物总数检查-薄膜过滤法任务三葡萄糖酸钙口服液的微生物总数检查-最可能数法目录

项目二微生物总数检查任务一葡萄糖酸钙口服液的微生物总数检查-平皿法

任务引入请思考葡萄糖酸钙口服溶液用于预防和治疗钙缺乏症，如骨质疏松、手足抽搐症、骨发育不全、佝偻病，以及儿童、妊娠和哺乳期妇女、绝经期妇女、老年人钙的补充。某企业生产了一批葡萄糖酸钙口服溶液，根据《中国药典》2020年版要求需要进行微生物限度检查。请按照供试品取样要求抽取一定数量的葡萄糖酸钙口服溶液，并按照规定确定检验数量、检验量。查询《中国药典》2020年版四部通则1105（非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法），选择平皿法，进行微生物计数，判断被检药品是否符合微生物限度规定。

任务分析（１）《中国药典》2020年版规定的微生物计数方法包括平皿法、薄膜过滤法和最可能数法（简称MPN法）。本任务以葡萄糖酸钙口服溶液为材料，选择平皿法进行微生物计数。（２）对微生物计数需要制备适合微生物生长的培养基，并将微生物培养成肉眼可见的菌落。因此，应按照培养基配方完成培养基制备及其适用性检查。

任务分析（３）平皿法是《中国药典》2020年版规定的微生物计数方法之一。对于所选择的计数方法还需要进行计数方法适用性试验。（４）按照《中国药典》2020年版规定，确定葡萄糖酸钙口服溶液的检验数量、检验量，保证供试品抽样的客观性，采用无菌操作完成供试品检查。按照规定进行菌落计数并完成检验报告。

任务分析本任务的工作内容及要求见下表。工作内容工作要求关键点供试液的制备采取适宜方法制备供试液稀释比例菌液制备选取规定菌株培养，制备菌液菌株选择、培养及菌液制备培养基制备正确选择培养基，完成制备计算、称量、调节pH值、分装、灭菌培养基适用性检查接种培养、计数判定培养、结果判定培养基无菌检查抽检培养基放置于相应培养箱中定期观察计数方法适用性试验试验组、供试品对照组、菌液对照组设置方法适用性判断供试品接种供试品抽样、接种无菌操作阴性对照阴性对照操作对照设计培养及观察培养、观察、记录细菌、真菌培养条件结果判断菌落计数、报告有效结果、检品合格结果

相关知识-微生物计数法1.微生物计数法的概念及要求微生物计数法系用于能在有氧条件下生长的嗜温细菌和真菌的计数。微生物计数法用于检查非无菌制剂及其原、辅料等是否符合规定的微生物限度标准时，应按《中国药典》2020年版规定进行检验，包括样品的取样量和结果的判断等。除另有规定外，微生物计数法不适用于活菌制剂的检查。微生物计数试验环境应符合微生物限度检查的要求。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。洁净空气区域、工作台面及环境应定期进行监测。

相关知识-微生物计数法２.计数方法供试品检查时，应根据供试品理化特性和微生物限度标准等因素选择计数方法，检测的样品量应能保证所获得的试验结果能够判断供试品是否符合规定。3.计数培养基适用性检查和供试品计数方法适用性试验供试品微生物计数中所使用的培养基应进行适用性检查；计数方法应进行方法适用性试验，以确认所采用的方法适合于该产品的微生物计数。当检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时，计数方法应重新进行适用性试验。

相关知识-非无菌药品微生物限度标准非无菌药品的微生物限度标准是基于药品的给药途径和对患者健康潜在的危害以及药品的特殊性而制订的，不同药品的微生物限度标准不同。药品生产、贮存、销售过程中的检验，药用原料、辅料、中药提取物及中药饮片的检验，新药标准制订，进口药品标准复核，考察药品质量及仲裁等，除另有规定外，其微生物限度均以此标准为依据。

任务实施一、制订工作计划序号工作内容完成时间成员负责人1查询标准???2培养基制备???3培养基无菌检查4培养基适用性检查5供试液制备6菌液制备7方法适用性试验8供试液接种9培养及观察10结果判断???根据任务要求，制定合理工作进度计划，并根据小组成员的特点进行分工。

任务实施二、试验前准备设备、器材、试剂规格数量用途无菌室操作场所超净工作台操作区域酒精灯局部无菌环境75％乙醇擦拭消毒pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液制备供试液胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基为微生物