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BacteriaFacilitateEntericVirus
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1、筛选可结合脊髓灰质炎病毒的菌株?2、特定菌株可增强病毒的感染性?3、特定菌株可促进病毒共感染?4、细菌介导的病毒共感染与细菌与宿主细胞的粘附相关?5、特定菌株可促进脊髓灰质炎病毒基因重组结果
背景介绍结果1:筛选可结合脊髓灰质炎病毒的菌株电镜观察:脊髓灰质炎病毒可与多种G+和G-菌结合,且一个细菌上可结合多个病毒颗粒
背景介绍结果1:筛选可结合脊髓灰质炎病毒的菌株Pull-down试验结果:1、磁珠结合了2%的病毒,32/36的菌株结合病毒的数量显著高于磁珠。2、脊髓灰质炎病毒即可结合G+菌也可结合G-菌,结合有效率为4-37%。3、一株从粪便中分离得到的约氏乳酸菌的结合效率最高。
背景介绍结果1:筛选可结合脊髓灰质炎病毒的菌株传代原代EPS+EPS-EPS过表达EPS↓,无EPS2
背景介绍结果1:筛选可结合脊髓灰质炎病毒的菌株约氏乳酸菌表面多糖EPS的表达量与结合病毒的能力无相关关系
背景介绍结果2:特定菌株可增强病毒的感染性高通量流式分析
背景介绍结果2:特定菌株可增强病毒的感染性结果:对照组只有1%的细胞被病毒感染(0.5%DsRed/0.5%GFP);13/41的菌株增强了病毒的感染性。
背景介绍结果2:特定菌株可增强病毒的感染性细菌结合病毒能力与病毒感染细胞数无相关性
背景介绍结果2:特定菌株可增强病毒的感染性除L.JohnsoniiFecalisolate有少量升高外,其余菌株均未增强病毒感染性约氏乳酸菌结合病毒能力与病毒感染细胞数无相关性
背景介绍结果3:特定菌株可促进病毒共感染高通量流式分析对照组(磁珠和PBS)只有0.006%的双阳性细胞,和泊松分布预测的概率相近(0.005%),说明是小概率事件。实验组有39%的菌株可显著增加双阳性细胞(病毒共感染)的比例,是磁珠的两倍以上。
背景介绍结果3:特定菌株可促进病毒共感染L.johnsoniiFecalisolate,ΔepsA,andΔepsE是磁珠的5-6倍。
背景介绍结果3:特定菌株可促进病毒共感染细菌结合病毒的能力与双阳性细胞的比例无相关性
背景介绍结果3:特定菌株可促进病毒共感染感染细胞总比例与双阳性细胞比例之间具有相关性
背景介绍结果4:细菌介导的病毒共感染与细菌与宿主细胞的粘附相关只有S.entericaserovarTyphimurium显著高于其他菌株,所有菌株侵入比例均低于0.005%。说明细菌不是通过侵入宿主细胞促进病毒共感染侵入实验
背景介绍结果4:细菌介导的病毒共感染与细菌与宿主细胞的粘附相关粘附实验细菌粘附细胞效率变异度较大0.02-9%
背景介绍结果4:细菌介导的病毒共感染与细菌与宿主细胞的粘附相关细菌粘附细胞效率与双阳性细胞比例呈正相关
背景介绍结果4:细菌介导的病毒共感染与细菌与宿主细胞的粘附相关细菌通过粘附宿主细胞促进病毒共感染
背景介绍结果4:细菌介导的病毒共感染与细菌与宿主细胞的粘附相关细菌粘附细胞效率与病毒总感染率之间无相关性,说明细菌对宿主细胞的粘附性不影响病毒总感染率,而是增加了其中共感染细胞的比例
背景介绍结果5:特定菌株可促进脊髓灰质炎病毒基因重组
背景介绍结果5:特定菌株可促进脊髓灰质炎病毒基因重组对照组:单独:33℃-drug二者均可有效复制33℃+drugDrugS/TempR病毒滴度下降6200倍39℃-drugDrugR/TempS病毒滴度下降26000倍39℃+drug二者滴度均下降至少75000倍(Fig.S5B)混合:39℃+drug滴度少量增加,产生少量噬斑,是单独感染的20倍以上。(Fig.S5AB)
背景介绍结果5:特定菌株可促进脊髓灰质炎病毒基因重组测序验证:检测了24个噬斑中病毒的序列,20/24个噬斑(83.3%)的病毒确实为重组病毒。其余4个发生了突变。重组率在1.6×10-4到1.2×10-3之间。Prevotellaruminicola,L.johnsonii-Fecalisolate,ΔepsE,andΔepsA的重组率是PBS的4-5倍
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