细胞免疫组织化学特殊染色方法.pptVIP

同时显示胶原纤维和弹性纤维Gomori氏醛-复红染液是Gomori在试验期间偶然发现的由碱性品红、三聚乙醛、浓盐酸配制而成。伊红-醛复红染色法Gomori醛-复红染液：70%乙醇100ml，碱性品红0.5g，一、试剂配制注意：先将碱性品红溶于乙醇中，然后加入三聚乙醛和浓盐酸，静置1-2d，待溶液变为深紫色后，过滤置于冰箱待用。三聚乙醛1ml，浓盐酸1ml。三、制作过程1、取皮下组织铺于干净的载玻片上，自然晾干。2、放在甲醛-乙醇固定液内固定5min；3、水洗3min；4、置于醛-复红染液中，室温下染色5min；5、水洗5min；6、置伊红染液中，染色30s；7、常规脱水、透明、封片。四、结果胶原纤维为红色，长带状，波浪状走行；弹性纤维为紫色，细丝状，直行，末端卷曲。二、取材皮下组织肥大细胞内含粗大的嗜碱性、异染性的水溶性颗粒，这些物质含有高分子的多硫酸脂和硫酸黏多糖类，能够与甲苯胺蓝染色显示肥大细胞颗粒内含有组胺、肝素等活性物质，甲苯胺蓝、美篮、中性红、硫堇等染料结合。取材皮下组织固定Carnoy液或10%中性福尔马林液皮下组织铺于干净的载玻片上，自然晾干后固定，或石蜡切片，冰冻切片更好染液配制甲苯胺蓝溶液：甲苯胺蓝0.2g60%乙醇100ml混匀即可反复使用。染色过程石蜡切片脱蜡下行至蒸馏水；入甲苯胺蓝溶液染色，室温10-30min；蒸馏水洗；丙酮或100%乙醇脱水两次，各2min；二甲苯透明，树胶封固。结果肥大细胞颗粒呈紫色，核浅蓝色。细胞免疫组织化学特殊染色方法单击此处添加小标题特殊染色用于显示标本中的一些结构，使其在显微镜下与其它组织或细胞区别.单击此处添加小标题特殊染色单击此处添加小标题单一特殊染色单击此处添加小标题复合特殊染色单击此处添加小标题一种染料对一种组织结构或细胞进行染色单击此处添加小标题多种染料对多种组织结构或细胞进行染色01添加标题糖原染色方法：02添加标题糖原为细胞内的多糖或粘多糖，03添加标题肝细胞和肌细胞内的糖原最多。04添加标题糖原的多少，可以反映机体糖代谢的情况。05添加标题例如：06添加标题先天性糖代谢紊乱-葡萄糖-6-磷酸酶缺乏、07添加标题淋巴肉瘤、间皮瘤、肾上腺瘤，肝细胞内08添加标题都可聚集过多的糖原。过碘酸-雪夫反应（periodicacidSchiffreaction，PAS)原理：用过碘酸氧化多糖结构的碳键，使其形成2-醛基，与无色的品红结合生成紫红色品红复合物，沉淀于细胞内糖原分布部位，从而可证明多糖或粘多糖的存在。1、试剂配制（1）1%过碘酸水溶液：过碘酸1g双蒸水100ml将过碘酸溶于双蒸水中（2）Schiff试剂：双蒸水200ml碱性品红1g1mol/L盐酸20ml偏重亚硫酸钠2g（或亚硫酸氢钠）活性炭300mg01双蒸水煮沸后离火，慢慢加入品红，02搅拌至完全溶解，冷却至50℃时过滤，03加入盐酸，冷却至25℃时加入偏重亚硫酸钠04摇荡，密封置于暗处或4℃冰箱内24h。05溶液呈草黄色时，加入活性炭摇荡1min06快速过滤。避光4℃保存备用。36%盐酸85.6ml蒸馏水914.4ml(4)1mol/L盐酸(3)亚硫酸氢纳溶液10%偏重亚硫酸氢纳5ml1mol/L盐酸5ml蒸馏水90ml用前配制染色步骤切片入1%过碘酸液氧化2-5min。充分水洗后，过蒸馏水。入Schiff液10-20min（室温暗处）入亚硫酸氢纳液洗3次每次2min（去非特异性染色）流水冲洗10min，过蒸馏水。Mayer苏木精复染2-3min。流水冲洗，过蒸馏水，吸干。从95%乙醇开始脱水、透明、封片。01对照单击此处添加小标题03结果单击此处添加小标题02用1%淀粉糖化酶处理对照片20min.或用唾液（无气泡）消化对照片30min2次。单击此处添加小标题04细胞内糖原呈紫红色；对照片为阴性单击此处添加小标题Carnoy固定液: