灭菌及无菌空气的制备.ppt

1、种子罐、发酵罐、计量罐、补料罐等的空罐及管道灭菌从有关管道通入蒸汽，使罐内蒸汽压力达0.147Mpa。维持45min，灭菌过程从有关阀门排出空气，并使争取通过达到死角灭菌；灭菌结束，关闭蒸汽后，待罐内压力低于空气过滤器压力时，通入无菌空气保压0.098Mpa。2、空气总过滤器和分过滤器灭菌排出过滤器中空气，从过滤器上部通入蒸汽，并从下、下排气口排气，维持压力0.147Mpa，灭菌2h，灭菌完毕通入压缩空气吹干。第31页，共51页，星期日，2025年，2月5日3、种子培养基实罐灭菌从夹层通入蒸汽间接加热至80℃，再从取样管、进风管、接种管进蒸汽，进行直接加热，同时，关闭夹层蒸汽进口阀门，升温121℃，维持30min，谷氨酸发酵的种子培养基实罐灭菌为110℃，维持10min。4、发酵培养基实罐灭菌从夹层或盘管通入，蒸汽间接加热至90℃，再从取样管、进风管、接种管进蒸汽，进行直接加热，同时，关闭夹层蒸汽进口阀门，升温121℃，维持30min，谷氨酸发酵的种子培养基实罐灭菌为105℃，维持5min。5、.发酵培养基连续灭菌一般培养基为130℃，维持5min，谷氨酸发酵培养基为115℃，6~8min。第32页，共51页，星期日，2025年，2月5日第二节空气除菌城市上空空气中含有的细菌数为3000-10000个/m3，因此在空气引进发酵罐之前必须进行严格处理，除去其中含有的微生物和其他有害成分。抗生素、氨基酸和酶制剂等多数品种发酵，耗氧量大，无菌程度要求十分严格.一、通风发酵对无菌空气的要求1.空气中微生物的分布空气中含菌量随环境的不同而有很大的差异。2.发酵对空气无菌程度的要求一般按染菌机率为10-3来计算，即1000次发酵周期所用的无菌空气只允许1次失败。第33页，共51页，星期日，2025年，2月5日空气除菌设备空气过滤除菌的目的Ns10-3个/m3，同时使空气有一定压力空气过滤除菌流程普通空气冷却除菌流程高效前置过滤除菌流程第34页，共51页，星期日，2025年，2月5日高效前置过滤除菌流程第35页，共51页，星期日，2025年，2月5日空气预处理流程空气除菌总流程如下：

高空采风→粗滤器→空压机→贮罐→冷却器→油水分离器→丝网分离器→加热器→总过滤器→分过滤器→发酵罐第36页，共51页，星期日，2025年，2月5日空气除菌方法加热灭菌（220°C，20秒）

[灭菌彻底，能耗大，成本高]静电除菌

[除菌效果差，仅用于初除菌]辐射灭菌

[254-265nm效果最佳，仅限表面灭菌]介质过滤除菌

[主流的除菌方式]第37页，共51页，星期日，2025年，2月5日空气压缩机余热灭菌图第38页，共51页，星期日，2025年，2月5日过滤除菌(Filtersterilization)及其控制按除菌机制可分为：1绝对（表面）过滤2深层介质过滤第39页，共51页，星期日，2025年，2月5日关于灭菌及无菌空气的制备第1页，共51页，星期日，2025年，2月5日发酵工程无菌技术：纯培养发酵技术：发酵全过程只有生产菌，无杂菌第五章灭菌及无菌空气制备在发酵过程中夹杂其它杂菌造成的不良后果：杂菌污染使基质或产物被杂菌消耗，造成生产能力下降；杂菌产生的某些代谢产物，改变了培养液的理化性质，使提取精制发生困难；杂菌可能会降解目的产物，使得生产过程失败；杂菌会污染最终产品；发酵时如污染噬菌体，可使生产菌发生溶菌现象，使生产失败第2页，共51页，星期日，2025年，2月5日为了保证培养过程的正常进行，在接种要培养的微生物之前，需要进行灭菌与消毒。灭菌对象：培养基；设备与管道；空气系统；流加料、消泡剂；必要时还有对生产环境进行消毒，防止杂菌和噬菌体工业上具体措施包括：1）使用的培养基和设备须经灭菌；2）好氧培养中使用的空气应经除菌处理3）设备应严密，发酵罐维持正压环境；4）培养过程中加入的物料应经过灭菌；5）使用无污染的种子。第3页，共51页，星期日，2025年，2月5日消毒与灭菌在发酵工业中的应用消毒(disinfection)：用物理或化学方法杀死物料、容器器具内外病原微生物，而对被消毒的物体基本无害的措施。一般只能杀死营养细胞，例如巴氏消毒法（60℃，30min）。灭菌(sterilization)：用物理或化学方法杀死或除去物料、空气容器等环境中所有微生物，包括营养细胞、细菌芽孢和孢子。关系：消毒不一定达到