病毒感染的检查方法与防治原则1.ppt

第1页，共35页，星期日，2025年，2月5日第一节病毒感染的检查方法检测内容查病毒查特异性抗体病毒颗粒病毒抗原病毒核酸病毒酶类：如逆转录酶电镜直接观察光镜检查包涵体分离培养第2页，共35页，星期日，2025年，2月5日一、标本的采集与送检原则基本与细菌相似，还特别注意以下原则：采集急性期标本使用抗生素：标本用“双抗”或两性霉素B处理冷藏保存、快速送检采集双份血清第3页，共35页，星期日，2025年，2月5日二、病毒的分离与鉴定（一）病毒的分离培养细胞培养（cellculture）鸡胚接种（egginoculation）动物接种（animalinoculation）第4页，共35页，星期日，2025年，2月5日二、病毒的分离与鉴定一般程序：标本无菌处理动物接种鸡胚培养细胞培养指标阳性指标阴性病毒鉴定盲传2～3代指标阴性病毒阴性第5页，共35页，星期日，2025年，2月5日1.细胞培养根据生长方式分类：单层细胞培养（monolayercellculture）悬浮细胞培养（suspendedcellculture）从细胞来源、染色体特征及传代次数分类：原代细胞（primarycell）二倍体细胞（diploidcell）传代细胞系（continuouscellline）（一）病毒的分离培养第6页，共35页，星期日，2025年，2月5日病毒的细胞培养细胞培养瓶单层细胞第7页，共35页，星期日，2025年，2月5日1.细胞培养（1）原代和次代细胞培养组织组织块分散的单个细胞单层细胞剪碎培养基(原代细胞)单层细胞(次代细胞)传代培养蛋白酶特点：①对多种病毒敏感②生长能力有限,获取成本高③可携带潜伏病毒第8页，共35页，星期日，2025年，2月5日（2）二倍体细胞培养体外分裂50～100代仍保持二倍体染色体数目，可用于病毒分离和疫苗生产。特点：①对多种病毒敏感②不带异种蛋白(人源性)③不带病毒，无致瘤潜能④可传50代左右1.细胞培养第9页，共35页，星期日，2025年，2月5日（3）传代细胞培养特点：①对多种病毒敏感性高②繁殖能力高，传代时间长③有致癌危险，不能用于疫苗生产1.细胞培养第10页，共35页，星期日，2025年，2月5日病毒在培养细胞中增殖的指征：致细胞病变效应（cytopathiceffect,CPE）红细胞吸附（hemadsorption）病毒干扰作用（viralinterference）细胞代谢改变（一）病毒的分离培养第11页，共35页，星期日，2025年，2月5日第12页，共35页，星期日，2025年，2月5日①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落（1）致细胞病变效应（CPE）第13页，共35页，星期日，2025年，2月5日麻疹病毒感染细胞呼吸道合胞病毒感染细胞②形成多核巨细胞或称融合细胞（1）致细胞病变效应（CPE）第14页，共35页，星期日，2025年，2月5日③形成包涵体(inclusionbody)（1）致细胞病变效应（CPE）第15页，共35页，星期日，2025年，2月5日腮腺炎病毒感染细胞（2）红细胞吸附（hemadsorption）病毒囊膜表面血凝素(HA)＋红细胞表面HA受体第16页，共35页，星期日，2025年，2月5日（3）干扰现象（interference）风疹病毒＋猴肾细胞病毒增殖，CPE(－)埃可病毒＋猴肾细胞病毒增殖，CPE(＋)＋猴肾细胞风疹病毒埃可病毒埃可病毒被抑制，CPE(－)（4）细胞代谢改变第17页，共35页，星期日，2025年，2月5日2.鸡胚培养采用孵化9～14天的鸡胚绒毛尿囊膜（allantocherion）