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01020304用去垢剂分离小的跨膜蛋白,是膜蛋白研究的重要手段01当去除去垢剂并加入磷脂后,可使膜蛋白复性并恢复功能。03去垢剂使膜蛋白在水中溶解、变性、沉淀02用这种方法研究了膜中Na+-K+-ATP酶的功能。04膜上的蛋白少,则膜的功能相对单一蛋白:是膜功能的主要体现者。电子传递、能量转换神经髓鞘膜:蛋白质/脂类=0.23主要起绝缘的作用。如:线粒体内膜:蛋白质/脂类=3.2膜蛋白的功能:运输蛋白:转运分子进出细胞连接蛋白:细胞间连接、支撑连接受体:信号转导酶:催化细胞各部分的化学反应三、膜糖类(一)存在方式:主要与膜脂、膜蛋白以共价键形式形成糖脂和糖蛋白,糖基分布在膜的非胞质面。糖脂:低聚糖共价结合于脂类糖蛋白:低聚糖或多聚糖侧链结合于膜蛋白糖基化(门冬酰胺)糖基化(丝氨酸或苏氨酸)细胞表面覆盖有糖类糖被,或糖萼(glycocalyx):细胞表面存在一层多糖物质,厚约200nm,由细胞膜糖蛋白和糖脂的糖链向外伸展交织而成。真核生物细胞膜上的蛋白质几乎都是糖蛋白。在动物细胞中,糖蛋白是糖萼的主要成分,而在植物细胞中,主要由糖脂构成膜包被。凝集素(lectin)是能与糖类特异结合的蛋白质,能使细胞发生凝集。凝集素能与细胞表面的糖蛋白、蛋白多糖、糖脂结合,而且不同凝集素识别糖基的不同特异序列,发生特异性结合,因此凝集素用于定位和分离各种含糖的细胞膜分子。ITC标记的凝集素能直接与组织细胞内的糖基结合,从而显示糖基的位置,可用于检测组织细胞中的糖成分,阳性部位呈黄绿色荧光。脂双层构成细胞膜的连续主体,它既具有固体分子排列的有序性,又具有液体的流动性膜中球形蛋白分子以各种形式与脂双分子层结合。蛋白质分子的非极性部分嵌入脂类双分子层的疏水区,极性部分外露于膜的表面此模型强调了膜的不对称性和流动性细胞膜的特性液态镶嵌模型结构(一)膜的不对称性1.膜脂分布的不对称性外层含鞘磷脂、磷脂酰胆碱(卵磷脂)较多内层含磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸较多糖脂都是在非胞质侧膜蛋白在膜的脂质双分子层中可以分布在膜的内表面、外表面、或不同程度的镶嵌在膜内。分布不对称。01一般说,细胞质面的蛋白比外表面少,一些酶和受体多处于外表面。022.膜蛋白的不对称性*********对细胞某一部位进行光照脱色,对此处荧光恢复的速度进行检测,从而得知膜流动性的特征。Chapter4细胞质膜(PlasmaMembrane)细胞质膜(plasmamembrane)是指围绕在细胞最外层极薄的膜,又称细胞膜(cellmembrane),主要由脂质和蛋白质组成。围绕各种细胞器的膜,称为细胞内膜(internalmembrane)。生物膜(biomembrane):质膜和内膜在起源、结构和化学组成等方面具有相似性,总称为生物膜。习惯上把细胞所有膜结构的统称生物膜。4.1质膜的研究历史“三夹板”式模型单位膜1972年辛格和尼克尔松液态镶嵌模型细胞膜的研究材料血影:哺乳动物或人的成熟红细胞的核与细胞内的细胞器均消失,仅有细胞膜包围一团原生质组成。将其经低渗处理,造成溶血现象,血红蛋白和无机盐等被溢出细胞外,剩下的“空壳”称为血影。低渗处理红细胞血影低渗有漏隙的血影封闭的血影破碎DCAB脂筏(lipidraft)脂筏(lipidraft):质膜上存在特殊的结构域微区,富含胆固醇、鞘磷脂。脂质紧密结合成单元,可在质膜的疏松排列的脂类中漂移,如同漂浮在脂双层上的脂筏。脂筏上载有执行特定功能的各种膜蛋白。4.2细胞膜的化学组成——约占膜干重的30-70%——约占膜干重的20-70%细胞膜脂类蛋白质糖类——约膜干重的10%一、膜脂(Membranelipids)1)磷脂:双型性分子,约占膜脂的50%以上。如:磷脂酰胆碱(卵磷脂,PC)磷脂酰丝氨酸(PS)2)胆固醇:双型性分子,含量低于1/3。羟基为极性头部,3)糖脂:双型性分子,在膜中含量较少。头部为糖残基如:半乳糖脑苷脂、神经节苷脂类型:分子特性:双极性分子磷脂酰胆碱胆固醇半乳糖脑苷脂膜脂双极性的意义在生物膜中脂类部分的形成,是一个自我组装的过程,磷脂分子自发形成双层,具有自我组装自我封合的特点。膜脂是膜的基本骨架,膜蛋白是膜功能的主要体现者。二、膜蛋白(membraneproteins)类型:010203外在膜蛋白(外周膜蛋白)内在膜蛋白(整合膜蛋白)脂锚定蛋白冰冻蚀刻技术
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