细胞培养-细胞培养用液及培养基.ppt

细胞培养用液及培养基（液）主要内容培养基（液）培养用液主要内容培养用液培养基（液）细胞培养时，除需要培养基，还需要大量的液体，包括培养用液水盐溶液消化液缓冲液维生素液等细胞培养所必须的成分（吸收与代谢）维持细胞形态、调节渗透压及PH细胞培养对水质的要求极高水培养用液自来水22%离子交换水40%蒸馏水（三蒸）38%水培养用液培养用液水水超纯水将水中的导电介质几乎完全去除，又将水中不离解的胶体物质、气体及有机物均去除至很低程度的水。电阻率大于18MΩ*cm，或接近18.3MΩ*cm极限值。培养用液平衡盐溶液（BSS）培养用液组织细胞培养基中常用的基本液体。功能维持渗透压、调节PH、供给细胞生存所需能量及无机离子成分。用途合成培养基（液）的基础液及用于洗涤组织、细胞等010302培养用液平衡盐溶液消化液-用途培养用液分散组织、细胞使细胞脱离附着底物消化液-成分培养用液胰蛋白酶二乙烯四乙酸二钠（EDTA）胶原酶溶液消化液-胰蛋白酶培养用液胰蛋白酶：从动物胰脏分离的一种水解酶功能：使细胞间的蛋白质水解、细胞分散配置比例：1:125或1:250消化液-胰蛋白酶培养用液注意事项配置胰蛋白酶消化液时应采用不含Ca2+、Mg2+和血清的液体使用时，一旦细胞分散后，立即用适量含血清的培养基终止消化反应培养用液消化液-EDTAEDTA是一种化学螯合剂，能螯合Ca2+、Mg2+而使细胞分离，对细胞毒性较小。工作浓度：0.02%培养用液消化液-EDTA注意事项需用不含离子的平衡盐缓冲液溶解与胰酶联合使用可提高消化效率EDTA不能被血清中和，消化后应彻底 清洗21维持体外细胞生存和生长的基本溶液，是组织细胞培养最重要的条件分类合成培养基天然培养基3培养基（液）取自动物体液或从动物的组织中分离提取01优点营养成分丰富，培养效果良好02缺点成分复杂，来源受限03培养基（液）-天然培养基类型培养基（液）-天然培养基生物性液体（血清）组织浸液（胚胎浸液）凝固剂（血浆）……最常用的天然培养基促进细胞生长繁殖、粘附并中和usu常用的血清为小牛血清和胎牛血清血清培养基（液）-天然培养基使用前需灭活0120℃保存，避免反复冻融02优质血清外观为透明、无溶血、淡黄色液体、无沉淀，灭活后颜色略深03保证无菌，且球蛋白含量越低者质量越佳04血清-使用注意事项培养基（液）-天然培养基细胞集落形成率连续传代培养生长曲线法血清-鉴定方法培养基（液）-天然培养基血浆可支持培养组织块，且还供给细胞生长的营养物质，但易发生液化。常用禽类血浆小于一岁的雄性鸡类该类血浆钙水平恒定，激素含量少，易于采集，整个采集过程需要注意无菌0102培养基（液）-天然培养基对细胞体内生存环境中各种已知物质在体外人工条件下模拟1为细胞提供了一个近似体内生存环境、又便于控制和标准化的体外生存环境。2培养基（液）-合成培养基