细胞工程单克隆抗体与抗体工程.ppt

第1页，共32页，星期日，2025年，2月5日一：细胞融合1：细胞融合技术定义与应用价值细胞融合（cellfusion）又称体细胞杂交（somatichybridization）或细胞杂交（cellhybridization），是指在离体条件下用人工方法将不同种生物或同种生物不同类型的单细胞通过无性方式融合成一个杂合细胞的技术。利用细胞融合技术使不同的细胞融合成一个新的杂合细胞，这个新的细胞就获得了两个亲本细胞的遗传信息和细胞质，从而具备有两个亲本细胞的优点。第2页，共32页，星期日，2025年，2月5日细胞融合技术的应用价值细胞融合能重新组合两个亲本细胞的优良遗传信息，是研究细胞间遗传信息传递、基因在染色体上定位、改良动物遗传特性、及创造新的符合人类需要的新的细胞系的极为有效的手段。第3页，共32页，星期日，2025年，2月5日植物细胞融合与人造小鼠培育过程第4页，共32页，星期日，2025年，2月5日细胞融合过程——三个阶段融合前准备细胞融合及融合后的细胞管理第5页，共32页，星期日，2025年，2月5日融合前准备主要包括细胞培养材料准备、选择免疫动物、抗原及免疫方案设计等；第6页，共32页，星期日，2025年，2月5日细胞融合一个相对简单的过程，包括骨髓瘤细胞准备、脾细胞分离、融合操作等。用于细胞融合的融合剂可以是病毒、化学试剂，或采用电融合技术进行融合。在最近的二十多年来，细胞融合技术有了长足的发展，其本身也已成为一们专门的技术在生命科学领域中发挥巨大作用。第7页，共32页，星期日，2025年，2月5日融合后的管理对融合细胞进行筛选与克隆、优良细胞传代与保存等；第8页，共32页，星期日，2025年，2月5日细胞融合的关键技术方法1）?动物选择、免疫方案设计、免疫途径确定2）?亲本细胞准备、融合技术（条件、物质手段、融合管理）电融合技术细胞克隆：有限稀释法（limiteddilutiontechnology）和软琼脂法（softagarcloningtechnology）3）?融合后细胞管理第9页，共32页，星期日，2025年，2月5日细胞融合技术最有意义的成果之一就是单克隆抗体的制备。单克隆抗体在生物、农业、医疗、制药等众多领域得到极为广泛的应用；尤其是人源性单克隆抗体制备技术的发展，使单克隆抗体具有更高的实用价值。第10页，共32页，星期日，2025年，2月5日单克隆抗体技术1：抗体的结构与功能第11页，共32页，星期日，2025年，2月5日抗体的结构第12页，共32页，星期日，2025年，2月5日抗体的功能——抗原结合活性和特异性（Fab）——激活肌体免疫反应（Fc）激活补体系统介导ADCC、K、NK毒性反应与激活Fc---R结合第13页，共32页，星期日，2025年，2月5日杂交瘤技术原理与过程第14页，共32页，星期日，2025年，2月5日杂交瘤技术原理利用两种细胞突变株，一株为TK-、HGPRT+，另一株为HGPRT-、TK+。在一般培养条件下，细胞可利用主要途径合成DNA，这些突变细胞能正常生长。当主要途径被氨基碟呤阻断时，这两株细胞不能增殖；如将这两株细胞融合，则只有异核体杂交瘤细胞能在HAT培养基上存活，因为两种细胞相互补充了另一种细胞缺失的酶；而未融合的细胞或自身融合的同核体细胞仍然是而TK-或HGPRT-而被淘汰。第15页，共32页，星期日，2025年，2月5日杂交瘤技术过程第16页，共32页，星期日，2025年，2月5日单克隆抗体的改造与应用第17页，共32页，星期日，2025年，2月5日1：单克隆抗体靶向技术与

靶向单抗应用单克隆抗体靶向制剂——利用抗体的特异性，将药物连接到抗体上，在特定的部位发挥作用的制剂。制备方法：与药物直接连接McAb小分子药物大分子药物第18页，共32页，星期日，2025年，2月5日应用：——特异性溶解血栓药物——抗肿瘤药物——其它药物第19页，共32页，星期日，2025年，2月5日2：人源性单抗的制备方法EBV转化技术EBV转化---融合技术嵌合抗体技术改型抗体技术噬菌体抗体库技术第20页，共32页，星期日