药品微生物检验技术 课件 模块二 项目三 控制菌检查.pptx

《药品微生物检验技术》模块二药品安全性检查项目三控制菌检查

任务一银杏叶片中大肠埃希菌的检查任务二藿香正气水中金黄色葡萄球菌的检查任务三五灵脂中沙门菌的检查任务四沙丁胺醇吸入气雾剂中铜绿假单胞菌的检查任务五硝酸益康唑栓中白色念珠菌的检查任务六妇必舒阴道泡腾片中梭菌的检查目录

项目三控制菌检查任务一银杏叶片中大肠埃希菌的检查

任务引入请思考银杏叶片具有活血、化瘀、通络等作用，主要用于治疗心血管类疾病，有降压、降低胆固醇等功效，且对动脉硬化引起的痴呆等有一定的疗效，是老年人常用药物。这类非无菌药品在控制菌检查方面有什么特殊要求呢？

任务分析（１）对大肠埃希菌的检查为定性检查，因此需要借助鉴定培养基进行菌种鉴定。（２）按照培养基配方完成培养基制备，并进行适用性检查，在确保培养基适用于该试验后，该培养基才能被采用。（３）控制菌检查需要做方法适用性试验，以确定该方法是适用于该试验的。（４）按照《中国药典》2020年版的规定，确定银杏叶片的检验数量、检验量，保证供试品抽样的客观性，在无菌室中完成供试品控制菌检查，观察培养基上是否有菌落生长，并对其进行品种鉴定。

任务分析工作内容及要求见下表。工作内容工作要求关键点培养基制备正确选择培养基，完成制备计算、称量、调节pH值、分装、灭菌培养基适用性检查菌液制备、菌液接种、培养观察培养基适用性判断方法适用性试验供试组、对照组设置方法适用性判断供试品接种供试品抽样、接种正确抽样、试管口无菌操作、培养皿无菌操作、无菌环境维持对照实验阳性对照、阴性对照操作对照设计培养及鉴定培养、观察、记录大肠埃希菌培养条件、鉴定现象结果判断结果判断有效结果、检品合格结果

相关知识控制菌检查法的检查对象为非无菌产品，用于检查供试品中是否存在特定的微生物。《中国药典》2020年版制剂通则要求以动物、植物、矿物来源的非单体成分制成的片剂，生物制品片剂，以及黏膜或皮肤炎症或腔道等局部用片剂（如口腔贴片、外用可溶片、阴道片、阴道泡腾片等），按照通则1106（非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法）检查，应符合规定。控制菌检查法的检查对象

相关知识（１）非无菌药品需要根据其用药途径、目标人群的用药特点等进行一项或多项控制菌的检查，以此为患者的用药安全负责。（２）非无菌药品中可能的微生物污染来自制水系统、原料、辅料、设备、人员和环境等，生产的过程控制和生产加工工艺直接影响最终的微生物污染水平，如果在检验过程中发现了控制菌，则表示在某环节出现了污染、控制措施处于失控状态或生产工艺异常，提示企业应根据风险评估结果进行偏差调查并采取必要措施。控制菌检查的意义

相关知识大肠埃希菌为肠杆菌科埃希菌属细菌，是人和动物体内的常住菌，在肠道中可合成维生素B和维生素K。但有些菌株可感染人和动物，引起腹泻、化脓和败血症。大肠埃希菌随粪便排出体外，污染环境。药品受到粪便污染，有可能带有肠道致病菌或寄生虫卵等病原体。药品中检出大肠埃希菌表明该药品已受到粪便污染，服用后有可能被病原体感染。大肠埃希菌

任务实施一、制订工作计划序号工作内容完成时间成员负责人1培养基制备2培养基适用性检查3方法适用性试验4供试品接种5对照试验6培养及鉴定7结果判断根据任务要求，制定合理工作进度计划，并根据小组成员的特点进行分工。

任务实施二、试验前准备设备、器材、试剂规格数量用途无菌室操作场所超净工作台操作区域酒精灯局部无菌环境75%乙醇擦拭消毒银杏叶片供试品胰酪大豆胨液体培养基、麦康凯液体培养基、麦康凯琼脂培养基、曙红亚甲蓝琼脂培养基、MUG(4-甲基伞形酮葡糖苷酸)营养培养基、磷酸盐葡萄糖胨水培养基、枸橼酸盐培养基为微生物提供营养物质，进行大肠埃希菌的鉴定

任务实施二、试验前准备设备、器材、试剂规格数量用途移液器定量移取供试液试管、试管架容器、支架培养皿容器培养箱细菌培养菌种培养基适用性检查、检查方法适用性试验、阳性对照补充1：补充2：

任务实施三、培养基制备按照胰酪大豆胨液体培养基、麦康凯液体培养基、麦康凯琼脂培养基、曙红亚甲蓝琼脂培养基、MUG营养培养基、磷酸盐葡萄糖胨水培养基、枸橼酸盐培养基配方，计算实际所需培养基用量，根据培养基制备方式完成培养基制备。

任务实施三、培养基制备培养基名称配方制备1000mL实际