细菌性食物中毒的实验室支持泉州.pptVIP

增菌：用GN增菌液使处于濒死状态的细菌恢复活力选择性平板分离培养：XLD+MAC/显色培养基生化试验：可采用API20E或VITEK2血清学鉴定：特异性诊断血清鉴定到种。志贺氏菌操作流程增菌培养用志贺氏菌增菌液增菌,5℃±１℃，16h～20h厌氧培养。智能厌氧微需氧培养系统231取增菌后的GN增菌液或志贺氏增菌肉汤分别划线接种于XLD琼脂平板和MAC琼脂平板或RF志贺氏菌显色培养基平板上于36℃?1℃培养20h～24h，观察各个平板上生长的菌落形态若出现的菌落不典型或菌落较小不易观察，则继续培养至48h再进行观察。（二）分离培养初步生化鉴定从平板上挑取3～4个可疑菌落，接种TSI和葡萄糖半固体培养基各一管，36℃培养18～24h。初步生化鉴定TSI生长结果（现象）：半固体培养基：斜面产碱仍为粉红色或红色；底层产酸不产气，变黄色；不产硫化氢，不产黑色。沿线生长，无动力。在TSI表面呈蔓延生长的。0118～24h内发酵乳糖、庶糖的。02不分解葡萄糖，只在半固体培养基表面生长的。03产气的。04有动力的。05产硫化氢的。06可弃去地培养物：初步生化鉴定血清学分型（选做项目）先用四种志贺氏菌多价血清检查，如果呈现凝集，则再用相应各群多价血清分别试验。先用B群福氏志贺氏菌多价血清进行实验，如呈现凝集，再用其群和型因子血清分别检查，福氏志贺氏菌各型和亚型的型抗原和群抗原鉴别见表4。如果B群多价血清不凝集，则用D群宋内氏志贺氏菌血清进行实验，如呈现凝集，则用其Ⅰ相和Ⅱ相血清检查；如果B、D群多价血清都不凝集，则用A群痢疾志贺氏菌多价血清及1～12各型因子血清检查，如果上述三种多价血清都不凝集，可用C群鲍氏志贺氏菌多价检查，并进一步用1～18各型因子血清检查。志贺氏菌的O抗原人们原来的认识认为血清学试验是特异性的，但是志贺氏菌的O抗原和大肠埃希氏菌属关系密切，有半数的菌型与大肠埃希氏菌的某些O抗原完全相同。相同抗原菌属间存在血清交叉凝集反应。因此，生化试验对于属的鉴定是非常重要的。A、C群志贺菌O抗原外有K包膜抗原遮蔽，煮沸后再凝01可能是EIEC，再做大生化以鉴别02宋内的R相菌，用R相血清凝集03可能是蜂窝哈夫尼亚菌，做大生化以鉴别04可能是类志贺邻单胞菌，观察动力、氧化酶05若生化反应符合，而血清四种多价-，考虑：DCBA痢疾志贺菌1型福氏志贺菌2a型福氏志贺菌X变种鲍氏志贺菌13型E宋内志贺菌S相报告方式2005首次检出福氏志贺菌4c血清亚型（F4c），在随后的分离株中F4c亚型成为福建省福氏志贺菌分离株的优势血清型17/40(42.5%)继往流行的福氏2a、1b血清亚型分离的菌株数却减少说明福建省福氏志贺菌优势血清型别在发生更替。福建省福氏志贺菌优势血清型别金黄色葡萄球菌金葡菌食物中毒主要特征来源：主要存在于人们的皮肤、鼻、喉、耳等部位。进食了被污染的肉类、乳品、定粉制品。症状：恶心、呕吐（频繁而剧烈），腹痛、腹泻，由于剧烈呕吐和腹泻，可引起大量失水而发生外周循环衰竭和虚脱。潜伏期：一般30min～6h，最短为15min左右，很少有超过8h的。010302金黄色葡萄球菌

检验流程食物25g+生理盐水225mL，取5mL50mL7.5％NaCl肉汤血平板、B-P平板36℃24h染色镜检血浆凝固酶实验观察菌落形态报告呕吐物、粪便肛拭了、涂抹拭子3个连续稀释度接种B-P平板36℃48h10mL7.5％NaCl肉汤BHI肉汤和营养琼脂斜面B-P琼脂：菌落圆形、凸起、湿润，直径2～3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈，接种针接触菌落有似奶油至树胶样硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落，但无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并干燥。01血平板：形成较菌落较大，圆形、光滑凸起、湿润、金黄色（有时为白色），菌落周围可见完全透明溶血圈。02金黄色葡萄球菌菌落形态胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏提供碳源、氮源、硫、维生素和痕量矿物元素1丙酮酸钠是一种生长促进剂2亚碲酸盐对除金黄色葡萄球外的其他能分解卵黄的菌株有毒性，并使菌落产生黑色3卵黄提供营养和有利于观察卵磷脂环4甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用。5BP平板：金黄色葡萄球菌菌落形态完全溶血和不完全溶血β溶血α溶血0102应以找到病原体或其毒素为最终结论，在此之前所有的快速检验方法如PCR、