疫学所有实验.pptVIP

淋巴细胞亚群计数微量细胞毒试验免疫荧光技术在补体存在下，针对淋巴细胞CD分子的McAb与相应CD分子结合，可激活补体而使细胞溶解，通过活细胞和死细胞对染料着色的不同，即可判断待检细胞是否表达特定CD分子，从而对淋巴细胞亚群进行计数第二节一、免疫细胞及其亚类计数第二节二、淋巴细胞功能测定（了解）淋巴细胞功能测定的体外试验淋巴细胞增殖试验3H-TdR掺入法：MTT法：形态学计数法：制作：姚新生审校：孙万邦联系：yxspah@;0852-8204419上一页下一页返回本章首页第一节第二节第三节免疫学应用本科免疫学POWERPOINT讲稿免疫应用制作：姚新生审校：孙万邦联系：yxspah@;0852-8204419上一页下一页返回本章首页第一节第二节第三节免疫学应用本科免疫学POWERPOINT讲稿免疫应用免疫学检测乃借助免疫学、细胞生物学和分子生物学理论或技术，对抗原、抗体、免疫细胞及其分泌的细胞因子等进行定性或定量检测。免疫学检测技术在医学生物学研究领域得到广泛应用，并在临床实践中用于探讨免疫相关疾病的发病机制及其诊断、病情监测与疗效评价等。随着现代免疫学以及细胞生物学、分子生物学等相关学科的进展，免疫学检测技术不断发展和更新。1第一节基于抗原-抗体反应的检测方法2第二节免疫细胞的检测3第三节免疫分子的检测4第二十一章免疫学检测原理了解免疫学方法的研究概况、进展及在临床中的应用04熟悉三大标记技术的原理和方法及其应用03掌握免疫细胞和免疫分子常用检测方法的名称02掌握凝集反应和沉淀反应的概念01学习指导第一节基于抗原-抗体反应的检测方法抗原抗体结合反应的特点（熟悉）1特异性和交叉反应2抗原-抗体结合的带现象与可见性3抗体反应中，可能出现抗原或抗体过剩的情况，由于过剩一方的结合价不能被完全占据，多呈游离的小分子复合物形式，或所形成的复合物易解离，不能被肉眼察见，此为前带现象（prozone）即抗体过剩，或后带现象(postzone)即抗原过剩。4可逆性5抗原-抗体反应为分子表面的非共价结合，结合虽稳定但可逆。6第一节二、抗原-抗体反应的影响因素（熟悉）电解质酸碱度抗原抗体反应的最适pH是6~8。温度抗体-抗原反应的最适温度为37℃。（四）抗原和抗体的性质抗体的特异性和亲和力是决定抗原-抗体反应的关键因素。抗原和抗体的浓度、比例对抗原-抗体反应的影响最大，是决定性因素第一节三、抗原抗体反应的基本检测方法凝集反应（图21-1）（掌握）细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后，在一定条件下出现肉眼可见的凝集物，此为凝集反应(agglutination)。直接凝集间接凝集间接凝集抑制试验各种凝集反应示意图第一节三、抗原抗体反应的基本检测方法沉淀反应（掌握）可溶性抗原（血清蛋白质、细胞裂解液或组织浸液、各种微生物蛋白分子等）与相应抗体结合后，在一定条件下出现肉眼可见的沉淀，此为沉淀反应(precipitation)。单向免疫扩散(singleimmunodiffusion)123654免疫比浊(immunonephelometry)免疫电泳(immunoelectrophoresis)双向免疫扩散(doubleimmunodiffusion)单向免疫扩散(singleimmunodiffusion)双向免疫扩散(doubleimmunodiffusion)免疫电泳(immunoelectrophoresis)对流免疫电泳火箭免疫电泳第一节三、抗原抗体反应的基本检测方法补体参与的反应（了解）应用抗体与红细胞表面抗原结合，激活反应体系中的补体成分，根据溶血现象判定试验结果。补体结合试验和溶血空斑试验（后叙）均属此类反应。补体结合试验曾用于检测多种细菌、病毒的抗原或抗体，因易受多种试验条件影响，已渐被其他方法取代。此外，补体依赖的微量细胞毒实验曾用于HLA的血清学分型，方法是：将标准分型血清与待检淋巴细胞反应，再加入兔补体，若细胞表面表达相应HLA抗原，则被溶解。溶解细胞可被台盼蓝或伊红染料着色，而活细胞不着色，藉此判定结果。第一节三、抗原抗体反应的基本检测方法免疫标记技术（熟悉）免疫标记技术（immunolabellingtechnique）乃用荧光素、酶、放射性核素或化学发光物质等标记抗体或抗原，进行抗原-抗体反应的检测，是目前应用最为广泛的免疫学检