紫外分光光度计使用方法和原理PPT-新版.pptVIP

03单色器质量的优劣，主要决定于色散元件的质量。色散元件常用棱镜和光栅。02单色器01单色器的主要组成：入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。吸收池又称比色皿或比色杯，按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外区。吸收池吸收池的种类很多，其光径可在0.1~10cm之间，其中以1cm光径吸收池最为常用。4.检测器检测器的作用是检测光信号，并将光信号转变为电信号。现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。5.信号显示系统常用的信号显示装置有直读检流计，电位调节指零装置，以及自动记录和数字显示装置等。紫外/可见分光光度计的类型01按其光学系统可分为单波长分光光度计和双波长分光光度计。02双波长分光光度计双波长分光光度计的优点：是可以在有背景干忧或共存组分吸收干扰的情况下对某组分进行定量测定。分光光度计的校正和检验1波长校正吸光度校正杂散光的检验稳定性的检验2仪器测量条件的选择适宜的吸光度范围由朗伯-比尔定律可知：A=lg1/T=εcl微分后得：dlgT=0.4343dT/T=-εldc或0.4343ΔT/T=-εlΔc4分析条件的选择最适宜的测量范围为0.2~0.8之间。02代入朗伯-比尔定律有：Δc/c=0.4343ΔT/TlgT要使测定的相对误差Δc/c最小，求导取极小得出：lgT=-0.4343=A即当A=0.4343时，吸光度测量误差最小。01通常是根据被测组分的吸收光谱，选择最强吸收带的最大吸收波长为入射波长。当最强吸收峰的峰形比较尖锐时，往往选用吸收稍低，峰形稍平坦的次强峰或肩峰进行测定。入射光波长的选择缝宽度的选择为了选择合适的狭缝宽度，应以减少狭缝宽度时试样的吸光度不再增加为准。一般来说，狭缝宽度大约是试样吸收峰半宽度的十分之一。

?紫外/可见分光光度计的使用原理和方法1.紫外/可见吸收光谱2.朗伯-比耳定律3.紫外/可见分光光度计4.分析条件的选择5.测定方法6.在医学检验中的应用7.紫外/可见分光光度计使用领域紫外/可见分光光度法(Ultraviolet/Visiblespectrophotometry,UV/VIS)按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光光度法。它是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用，对物质进行定性分析、定量分析及结构分析,所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。321与其它光谱分析方法相比，其仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快;精密度和准确度较高;灵敏度高;选择性好;用途广泛。0102030405紫外/可见分光光度法的特点1.紫外/可见吸收光谱物质对光的选择性吸收物质对光的吸收是选择性的，利用被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性，这就是光谱法的基础。01通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度（吸光度），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得出该物质在测定波长范围的吸收曲线。如图3-1；02在吸收曲线中，通常选用最大吸收波长λmax进行物质含量的测定。2.有机化合物的紫外/可见吸收光谱与紫外-可见吸收光谱有关的电子有三种，即形成单键的σ电子、形成双键的π电子以及未参与成键的n电子。跃迁类型有：σσ*、nσ*、ππ*、nπ*四种。2.1有机化合物的电子跃迁饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ→σ*，n→σ*跃迁，吸收峰一般出现在真空紫外区，吸收峰低于200nm，实际应用价值不大。1不饱合机化合物的电子跃迁类型为n→π*，π→π*跃迁，吸收峰一般大于200nm。2生色团：是指分子中可以吸收光子而产生电子跃迁的原子基团。人们通常将能吸收紫外、可见光的原子团或结构系统定义为生色团。见表3-1和3-2。助色团：是指带有非键电子对的基团，如-OH、-OR、-NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等，它们本身不能吸收大于200nm的光，但是当它们与生色团相连时，会使生色团的吸收峰向长波方向移动，并且增加其吸收强度。红移和紫移在有机化合物中，常常因取代基的变更或溶剂的改变，使其吸收带的最大吸收波长λmax发生移动。向长波方向移动称为红移，向短波方向移动称为紫移。2.2有机化合物的吸收带吸收带(absorptionband):在紫外光谱中，吸收峰在光谱中的波带位置。根据电子及分子轨道的种类，可将吸收带分为四种类型。R吸收带K吸收带B吸收带