紫外可见分光光度法.ppt

2.光电比色法*光电比色计结构示意图通过滤光片得一窄范围的光(几十nm)滤光片*吸收滤光片：只允许指定的窄范围波长光通过，其他波长的光均被吸收.选择滤光片的原则：滤光片透光率最大的光是溶液吸收最大的光,即滤光片的颜色与有色溶液的颜色互补.3.吸光光度法和分光光度计*通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光.波长可调,故选择性好,准确度高.紫外-可见分光光度计基本组成*显示光源样品室单色器检测器分光光度计的主要部件*1光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够 的光强度,稳定。 ?/nm钨灯（热辐射光源）4006008001000氙灯（气体放电光源）氢灯强度1.光源在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500nm。紫外区：氢、氘灯。发射185～400nm的连续光谱。氙灯氢灯钨灯单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。2.单色器*0102030405入射狭缝：光源的光由此进入单色器；准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束；色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅；聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝；出射狭缝。二战期间，美国政府希望士兵得到较好的营养。但是当时，不知道食品中到底有什么维生素，有多少。在当时需要一个即便宜有快的方法。1941年，第一台commercialavailable的分光光度计问世。BeckmanDUSpectrophotometer.使得维生素的测定变得非常简单。假设这表示样品，I0为照射到样品上的一定波长的光强度（称为入射光强度），It为光通过样品之后的光强度。通过测量光强度的减弱来得出物质量，这种方法被称为分光光度法。那么，物质为何对光有选择性的吸收？光强度的减弱如何与物质的浓度联系起来？怎样测量光的减弱？第三节紫外—可见分光光度法*依据物质对光的选择性吸收建立起来的分析方法称为光化学分析法。光谱法和非光谱分析法。光谱分析法是指在光（其它能量）的作用下，通过测量物质产生的发射光、吸收光或散射光的波长和强度来进行分析的方法。1基本原理*特点准确度能够满足微量组分的测定要求：相对误差2～5％（1～2％）灵敏度高：测定下限可达10-5～10-6mol·L-1,10-4%～10-5%操作简便快速应用广泛光度法是基于被测物质的分子对光具有选择性吸收的特性而建立起来的分析方法。I0It光强的测量—分光光度计分光光度法的应用：定量测定与定性分析物质对光有选择性吸收—准备知识光强的减弱与物质浓度的关系？—朗伯-比尔定律测量光强度的减弱*光的基本性质(电磁波的波粒二象性)c－真空中光速2108m/s ~3.0×108m/s?－波长，单位：m,cm,mm,?m,nm,?1?m=10-6m,1nm=10-9m,1?=10-10m?－频率，单位：赫芝(周)Hz次/秒n－折射率，真空中为1光的传播速度:波动性X磁场向量传播方向YZx电场向量h－普朗克(Planck)常数6.626×10-34J·s?－频率E－光量子具有的能量单位：J(焦耳)，eV(电子伏特)1eV=1.602×10－19J12光量子，具有能量。3微粒性真空中:*结论:一定波长的光具有一定的能量，波长越长(频率越低)，光量子的能量越低.单色光：具有相同能量(相同波长)的光.混合光：具有不同能量(不同波长)的光复合在一起.例如白光.波粒二象性电磁波谱及分析方法*电磁波长(cm)10-8~10-1310-6~10-910-4~10-610-410-1~10-410-1~10-2102?10-5~10.1~100100~104104104~107nm10~400400~780780~3×105名称γ射线X射线紫外线可见光红外线短波中波能量(eV)104~109102~1051~102110-3~110-6~10-3~10-6能级跃迁原子核内层电子外层价电子分子轨道电子分子转动或振动未成对电子的偶极矩原子核的偶极矩利用吸收的分析方法γ射线吸收法X射线吸收法原子吸收法紫外吸收法可见光分光光度法红外吸收分析顺磁共振核