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种子生活力的快速测定.ppt

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实验6植物种子生活力的快速测定

种子生活力:指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。实验目的实验原理实验材料与设备实验步骤数据处理与结果分析注意事项思考题01了解种子生活力快速测定的方法02理解TTC/BTB/染料法测定种子生活力的原理实验目的TTC法凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化-还原反应,而无生活力的种胚则无此反应。当TTC溶液渗入种胚的活细胞内,并作为氢受体被脱氢辅酶(NADH或NADPH)还原时,可产生红色的三苯甲腙(TTF),胚便染成红色。如种胚死亡便不被染色;如种胚生活力下降,呼吸作用明显减弱,脱氢酶的活性亦大大下降,染色较浅;故可根据种胚染色的部位或深浅来鉴定种子的生活力。实验原理氯化三苯基四氮唑三苯甲腙TTC还原反应如下:活种子死种子活细胞呼吸释放CO2,CO2溶于水成H2CO3解离,使种胚周围环境酸度增加,用BTB来反映酸度的改变;01BTB变色范围为,酸性呈黄色,碱性呈蓝色,中间经过绿色(变色点为pH7.1)。02本实验观察种胚周围的黄色晕圈。03BTB溴麝香草酚蓝法而丧失生命力的种子,其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力,染料可自由进入细胞内使胚部染色。所以可根据种子胚部是否被染色来判断种子的生命力。02有生命力种子胚细胞的原生质膜具有半透性,有选择吸收外界物质的能力,一般染料不能进入细胞内,胚部不染色。01染料染色法活种子死种子材料、设备及试剂(一)材料:小麦种子(二)仪器设备:1.小烧杯;2.刀片;3.镊子;4.温箱(三)试剂:1.0.12%-0.5%TTC溶液(TTC可直接溶于水,溶于水后,呈中性,pH7±0.5,不宜久藏,应现用现配)。2.0.02%-0.2%靛红溶液或5%红墨水(酸性大红G)3.BTB溶胶BTB法煮沸的1%BTB琼脂胶约20ml,冷却倒胶至培养皿(1/3皿);取30粒完好的小麦种子,种胚向下插入胶(不软不硬);将培养皿置于35℃下培养1hr,对光观察,如种胚附近呈现较深黄色晕圈是活种子,否则是死种子。实验步骤*

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