细胞化学染色.pptVIP

【原理】胞浆内存在糖原或多糖类物质（如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等）中的乙二醇基（CHOH-CHOH）经过碘酸（periodicacid）氧化，转变为二醛基（CHO-CHO），与雪夫(Schiff)试剂中的无色品红结合，形成紫红色染料而沉积于胞浆中。该反应称为过碘酸一雪夫(PAS)阳性反应。126543【结果】粒细胞系：原粒细胞多呈阴性反应，也可弱阳性。自早幼粒细胞以后随着细胞的成熟程度，阳性反应逐渐增强。嗜酸粒细胞颗粒本身不着色，但颗粒间的胞质呈弥漫性阳性反应；嗜碱粒细胞为阳性反应，颗粒紫红色，大小不一。123456中性粒细胞糖原含量参考标准（-）胞质无颗粒（+）胞质呈淡红色，无颗粒（++）胞质呈红色，有少量颗粒（+++）胞质呈暗红色，颗粒较密（++++）胞质呈紫红色，颗粒极密淋巴细胞系：大多数淋巴细胞呈阴性反应，少数为（+）的阳性反应。淋巴细胞糖原含量程度参考标准（-）胞质内无颗粒（+）胞质内有颗粒（++）有较粗红色颗粒（+++）有粗大红色颗粒（++++）颗粒粗大并有红色块状红细胞系：幼红细胞和红细胞呈阴性反应红细胞系列糖原含量程度参考标准（-）胞质无颗粒（+）有少数红色颗粒（++）有较粗红色颗粒或弥漫红色（+++）有粗大红色颗粒或深红色（++++）有粗大红色块状或紫红色巨核细胞：巨核细胞和血小板染色反应均为阳性巨核细胞糖原含量程度参考标准（-）胞质无颗粒（+）少量糖原包涵体（++）中等量糖原包涵体，定位于核膜出或分散胞质中，占胞质1/3（+++）大量糖原包涵体分散于胞质的1/2（++++）糖原包涵体充满整个胞质巨核细胞包涵体单核细胞呈阴性或阳性，颗粒细小，往往位于胞质边缘；01浆细胞大多呈阴性，少数为红色颗粒阳性；02组织细胞为阴性反应；03巨噬细胞可呈阳性，为红色颗粒反应。04【临床意义】M6与巨幼贫的鉴别M6的幼红细胞PAS可呈强阳性，积分明显增高，巨贫、再障、溶贫时PAS反应为阴性。急性白血病的类型鉴别ALL，PAS呈大块状阳性，也可是阴性，AML为阴性，急性单核细胞白血病时原单核细胞及幼单核细胞PAS阳性，积分增高，阳性颗粒小而多，呈弥散分布。ALL-L1L1PAS(+)AML-M5M5PAS(+)AML-M6AML-M6PAS(+)AML-M7M7PAS(+)巨核细胞和Sternberg细胞鉴别巨核细胞PAS强阳性，Sternberg细胞为阴性或弱阳性。戈谢氏细胞强阳性，尼曼-皮克细胞阴性或弱阳性。淋巴肉瘤、霍奇金病等，淋巴细胞的糖原积分增高；一般的病毒感染，糖原积分在正常范围内。中性粒细胞碱性磷酸酶染色偶氮偶联法（Kaplow法）【原理】中性粒细胞胞浆中的碱性磷酸酶在pH9.2~9.8缓冲液中，能水解磷酸萘酚钠，并释放出磷酸与萘酚。再以重氮盐与萘酚偶联成不溶性有色偶氮染料沉淀于胞浆中。【结果】1坚牢蓝RR阳性为紫黑色颗粒，2坚牢紫酱GBC阳性为棕红色沉淀。3“一”阴性反应，胞浆中无阳性染色颗粒。4“＋”胞浆中含有少量颗粒或呈弥散浅红色（或弥散紫色）。5“2＋”胞浆中含有中等量颗粒或弥散受色。6“3＋”胞浆中有丰富的颗粒或弥散深色，胞核清晰。7“4＋”有极丰富的粗大颗粒，充满胞浆，或弥散深色，胞核不清晰。8细胞化学染色PART1细胞化学染色，是一种以形态为基础，结合运用化学或生物化学技术对血细胞内各种化学成分作定位、定性及半定量分析的方法。用于研究血细胞生理、病理和化学结构；临床上为某些血液病的诊断、鉴别诊断、疗效观察、预后监测和发病机制的探讨，提供重要依据。血细胞化学染色的基本要求是在原位显示细胞成分和结构，反应产物应是有色沉淀物，具有一定的稳定性。血细胞化学染色可显示糖原、脂类、酶、蛋白质等。壹贰01固定固定有物理法与化学法，物理法为干燥和火焰固定，化学法最常用的是甲醛、乙醇、丙酮和醋酸等。02血细胞化学染色流程偶氮偶联法：利用人工合成的酶底物，在酶作用下，产生分解产物，再与重氮盐结合引起偶氮偶联，使其形成不溶性的偶氮色素，以此证明酶的存在。联苯胺法：粒细胞和单核细胞中的过氧化物酶作用于过氧化氢，释放新生态氧，使无色的联苯胺形成蓝色沉淀。显示壹普鲁士蓝法：细胞内、外铁与酸性亚铁氰化钾作用，形成蓝色亚铁氰化铁沉淀。肆其他尚有物理学