结核病快速诊断进展.pptVIP

细胞壁革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌分枝杆菌脂质双分子肽聚糖MYCOLATElipid+LPSporinsacyllipidsarabinogalactaLAM两种主要结构成分双层磷脂doublelayerofphospholipids蛋白质proteins细胞膜01痰涂片操作程序原理02二甲苯问题假阴性假阳性技术错误涂片:太薄/太厚、暴露在紫外线下标本中的混杂物质/加热时间过长/使用污染的木签染色:染色质量不佳、未热染、染色时结晶/环境抗酸菌、间太短、脱落、涂片未固定交叉污染脱色:脱色不佳脱色不佳复染:过染染色不佳镜检员视力缺陷、仅观察少数视野、经镜油交叉污染读片错误：未经培训未经培训记录/报告：记录错误记录错误产生错误结果的常见原因细菌感染的诊断病人临床诊断血液生化Non-microbiologicalinvestigations影像学标本分泌物标本实验室检查是临床诊断的必要环节细菌学诊断显微镜检查术培养免疫学诊断分子生物学诊断GenProbe噬菌体检测方法HPLC其他OUTLINE结核分枝杆菌的细菌学诊断培养onplatesorinbrothidentificationbybiochemicalorserologicaltestsonpuregrowthfromsinglecolony显微镜检查脱色复染染色unstainedorstainedwithe.g.Gramstain药敏血清学DNA方法bydiscdiffusionmethods,breakpointsorMICs显微镜检查Gram-染色抗酸染色Ziehl-Neelsen荧光染色Direct,e.g.auramineImmunofluorescence培养SolidmediaAgarplatesForIdentificationForEnumerationSlopesForsafelong-termculture,e.g.Lowenstein-JensenmediaforTBLiquidmedia(broth)Forenrichmentormaximumsensitivity菌种鉴定形态学生长条件生化反应酶抗原分子生物学方法01血清学检测02分子生物学方法03其他（HPLC）非培养的诊断方法讨论的议题*什么是分子生物学诊断方法?01为什么用分子生物学诊断方法?02可得的分子生物学方法?0301显微镜检查有假阳性 -T.vaginalis,N.gonorrhoeae02胞内致病菌–viruses,M.genitalium03低敏感性 –Chlamydiasp.,Neisseriasp.04慢速生长–M.tuberculosis分子生物学方法是传统方法的必要补充分子生物学方法–如何发挥作用?每个微生物拥有一些种属特异的DNA序列分子生物学方法使得种属特异性DNA可以衡量法医鉴定分子生物学方法是一系列DNA初级结构的方法杂交的互补序列方法扩增合成种属特异的DNA序列-A-A-T-T-C-G-C-G-A-T-G--T-T-A-A-G-C-G-C-T-A-C--A-A-