真核基因表达的调控 (2).ppt

染色质体外重组实验：用盐或稀酸处理染色质，可将DNA、组蛋白和非组蛋白分开，经离子交换层析、乙醇沉淀等技术处理可分别获得上述三种组分。来自不同细胞的染色质组分混合后，能够重新组建成染色质。将无转录活性细胞的DNA和组蛋白与有转录活性细胞的非组蛋白混合，则产生转录活性。第63页，共109页，星期日，2025年，2月5日第三节转录和转录后加工的调控一、顺式作用元件与反式作用因子（一）顺式作用元件（Cis-actingsequences）启动子核心成分：如TATAbox；上游启动子成分：如CAATbox，GCbox、八聚体（octamer）以及ATF结合位点等；远上（下）游序列：如增强子，酵母的UAS（upstreamactivatorsequences），静息子等；特殊细胞中的启动子成分：淋巴细胞中的Oct和κB等。第64页，共109页，星期日，2025年，2月5日哺乳动物RNApolymerase启动子上游转录因子结合的序列元件组件保守序列DNA长度结合因子大小（kDa）丰度/细胞分布TATAboxTATAAA-10bpTBP27?普遍CAATboxGGCCAATCT-22bpCTF/NF160300000普遍GCboxGGGCGG-20bpSP116560000普遍OctamerATTTGCAT-20bpOct-176?普遍OctamerATTTGCAT23bpOct-252?淋巴细胞κBGGGACTTTCG-10bpNFκB44?淋巴细胞κBGGGACTTTCG-10bpH2.TH1??普遍ATFGTGACGT-20bpATF??普遍第65页，共109页，星期日，2025年，2月5日结合于反应性元件的特殊转录因子调节剂反应元件保守序列长度反应因子大小（kDa）热休克HSECNNGAANNTCCNNG27bpHSTF93糖皮质激素GRETGGTACAAATGTTCT20bp受体94佛波酯TRETGACTCA22bpAP139血清SRECCATATTAGG20bpSRF52（二）反式作用因子(Trans-actingelement)通用反式作用因子：一般细胞中普遍存在，如TBP，SP1，CTF/NF-1，Oct-1等;特殊组织和细胞中的反式作用因子：Oct-2;与反应性元件结合的反式作用因子:见下表。第66页，共109页，星期日，2025年，2月5日反式作用因子的调控作用途径：1）蛋白质与DNA相互作用；2）蛋白质之间的相互作用；