《EM样品的制备》课件2.pptVIP

EM样品的制备电子显微镜(EM)是一种强大的工具，可以观察纳米级尺度的样品。EM样品的制备是整个实验过程中的关键步骤，它直接影响成像效果和结果的准确性。

课程目标掌握EM样品制备方法了解EM样品制备的原理和步骤，熟练掌握常用技术。理解样品制备对成像的影响认识不同样品处理方法对最终成像结果的影响。学会分析EM图像掌握基本图像分析技巧，识别常见结构和特征。

什么是EM?EM是指透射电子显微镜(TransmissionElectronMicroscope)的缩写。透射电子显微镜是一种高分辨率显微镜，利用电子束照射样品，并通过透射电子形成图像。EM可以观察到纳米尺度的微观结构，对于材料科学、生物学、医学等领域的研究具有重要意义。

EM样品制备的重要性清晰的微观结构高质量的样品保证图像清晰，细节丰富，为后续分析提供可靠基础。提高研究数据的准确性和可信度，避免错误结论，为科研工作提供更准确的信息。精确的结构分析准确的样品制备可以避免样品变形或结构损伤，保证分析结果的真实性。为深入理解材料的微观结构，性质和功能提供可靠依据。

EM样品制备的基本流程样品前处理样品需要经过清洗、干燥等步骤，确保其清洁无污染。固定用化学试剂将样品固定，保持其原始结构和形态。脱水将样品中的水分去除，防止其在后续步骤中发生变形。临界点干燥用二氧化碳等临界流体替代水，防止样品发生收缩或变形。镀膜用金属或碳材料对样品进行镀膜，提高其导电性或表面清晰度。切割将样品切成合适的尺寸，方便装载到扫描电子显微镜中。装夹将样品固定在样品台上，确保其稳定性。上样将样品台放入扫描电子显微镜的样品室内。观察使用扫描电子显微镜对样品进行观察和分析。

样品前处理1清洗去除样品表面的污垢和杂质2干燥避免水滴影响观察结果3固定维持样品形态和结构样品前处理是EM样品制备的重要环节，它能够去除样品表面的污垢和杂质，防止水滴对观察结果的影响，并通过固定维持样品形态和结构。这对于获得清晰、真实的图像至关重要。

化学固定化学固定是EM样品制备的关键步骤，目的是使细胞或组织结构固定在特定的状态。1固定剂选择根据样品类型选择合适固定剂2浸泡固定将样品浸泡在固定剂中3冲洗去除多余固定剂常用的固定剂包括戊二醛、多聚甲醛等。固定剂的选择应考虑样品的类型和实验目的。

脱水1脱水步骤脱水是EM样品制备的关键步骤之一，旨在将样品中的水分去除，防止样品在后续步骤中发生变形或损坏。2常用方法常用的脱水方法包括梯度乙醇脱水、丙酮脱水、二氧化碳临界点干燥等，选择合适的脱水方法取决于样品的性质和实验要求。3注意事项在脱水过程中，需要注意控制温度和时间，避免样品发生过度收缩或变形，同时也要注意避免使用对样品有害的化学试剂。

临界点干燥1步骤一：置换用液态二氧化碳替代样品中的脱水剂，例如乙醇，避免样品表面张力过大而产生形变或收缩。2步骤二：加压将密闭容器内的二氧化碳气体加压至临界点压力，使二氧化碳处于超临界状态，此时二氧化碳具有液态和气态的双重性质。3步骤三：升温将密闭容器中的二氧化碳缓慢升温至临界点温度，使超临界二氧化碳完全汽化，并带走样品表面的水分，从而达到干燥的目的。

离子溅射镀膜1材料的选择根据样品特性选择合适的材料2镀膜厚度控制镀膜厚度，获得最佳图像效果3镀膜时间根据样品大小和厚度，调节镀膜时间4镀膜电流调整电流，控制镀膜速度和厚度离子溅射镀膜是EM样品制备的重要步骤，通过溅射金属或其他材料形成一层薄膜，使样品表面导电，提高图像质量。

样品切割目的切割样品至合适的尺寸，适合电镜观察。工具切片机、镊子、刀片。步骤用镊子夹住样品用切片机将样品切割成小块确保切面平整光滑注意事项切割过程中应注意安全，避免划伤。

样品装夹样品装夹是EM样品制备过程中至关重要的步骤，直接影响到后续的观察和分析效果。1选择合适的样品台根据样品的尺寸和形状选择合适的样品台，确保样品能够稳定固定。2固定样品使用导电胶或其他粘合剂将样品固定在样品台上，避免样品在观察过程中发生移动。3调整样品位置将样品调整到合适的位置，确保目标区域处于观察视野内。

样品上样样品上样是将准备好的样品放置到样品台上，确保样品能稳定地固定，并能被电子束照射到。1选择合适的样品台根据样品的大小和形状选择合适的样品台，确保样品能稳定固定。2放置样品将样品放置到样品台上，确保样品处于中心位置。3固定样品使用导电胶或其他固定方法固定样品，防止样品在真空环境中移动或脱落。

样品转移进机准备工作检查真空系统是否稳定，确保样品仓内无污染。样品转移将样品小心地放置在样品台上，避免接触其他部件。锁定样品使用样品夹具将样品固定在样品台上，确保样品位置稳定。抽真空关闭样品仓门，启动真空系统，抽真空至所需压力。样品对中使用电子束对中系统，将样品调整至电子束中心位置。

样品调焦1粗调移动载