细胞拆合与重组.pptVIP

用8μm的微玻璃吸管插入受精卵将原来的雌、雄核两核吸出01用微细管插入胚胎单细胞中把核吸出，然后移入刚刚受精的黑色纯系核受体亲鼠受精卵02这些核移植卵在新的whitten氏液内培养4-5d，发育到桑椹期或胚泡初期03C.细胞核移植4.6动物细胞核移植同功酶电泳分析，新生仔鼠具有供核个体的遗传性状，而不持有供体细胞质的个体（黑色）或作为寄母的假孕（白色）的遗传性状植入ICR品系的白色假孕小鼠子宫内着床发育产下仔鼠（全部与CBA/HT-6一样的灰色小鼠）D.克隆鼠的培养4.6动物细胞核移植1983年，Mcgrath和Solter首次利用显微操作技术和细胞融合技术，将单细胞期小鼠胚胎作为核供体进行核移植，得到了产仔，并建立了重复性很高的核移植程序，使得核移植效率大大提高。01Cheong等（1993）发现细胞周期早期的胚胎细胞核在受体细胞质中可以发生发育程序的重排，核移植胚胎的发育率明显提高。01有研究表明，小鼠囊胚期的滋养层细胞与ICM细胞一样具有发育的全能性（TsundaKato,1997;Sotomaruetal.,1999）。014.6动物细胞核移植动物细胞核移植胚胎分割胚胎细胞核移植胚胎干细胞核移植胎儿成纤维细胞核移植体细胞核移植胚胎嵌合哺乳动物克隆方法胚胎分割未着床早期胚胎，分割多等份动物细胞核移植技术成熟，成功率高胚胎分割次数越多，所含细胞数越少，发育成个体的能力越差胚胎细胞核移植未着床早期胚胎单个细胞去核未受精卵母细胞融合发育成胚胎移入受体4.6动物细胞核移植胚胎干细胞核移植胚胎干细胞系——具细胞全能性动物细胞核移植结合细胞核移植技术4.6动物细胞核移植1996年，英，用此法克隆出3只山羊胎儿成纤维细胞核移植4.6动物细胞核移植体细胞核移植1997年2月，英，爱丁堡罗斯林研究所，伊恩·维尔穆特多利多利羊（Dolly)风暴1997．2．27Nature385：810－813

多利羊

1996.7出生

1996.11收到文章

1997.2文章发表4.6动物细胞核移植4.6动物细胞核移植多利羊成为明星4.6动物细胞核移植多莉与它的假母4.6动物细胞核移植4.6动物细胞核移植4.6动物细胞核移植4.6动物细胞核移植4.6动物细胞核移植4.6动物细胞核移植4.6动物细胞核移植同步的方法。解决了用体细胞做核供体与转基因的问题解决了使核供体细胞与核受体细胞（去核卵细胞）克隆“多利”成功4.6动物细胞核移植4.6动物细胞核移植研究发现：在供体核植入受体胞质后，不管是供体还是受体，处在分裂中期时更容易恢复全能性，原因可能有两个如果供体核处于分裂中期，则供体核由于核膜的缺失，01010203使得受体的调控因子更容易与供体核发生接触而发生作用。02034.6动物细胞核移植*******克隆的概念01鱼类、两栖类的细胞核移植02哺乳类的细胞核移植03克隆技术的应用与意义04正确看待克隆技术05克隆动物的现状和发展趋势064.6动物细胞核移植含义外延无性繁殖的（产物）（形容词）动物细胞核移植Clone:指遗传上完全相同的分子、细胞或来自同一祖先的生物个体的无性繁殖群体。在不发生突变的情况下，它们应该有相同的遗传结构。Cloning:通过克隆方式生产克隆群体的过程或手段。4.6.1克隆克隆技术，无性繁殖的操作过程（动词）无性繁殖群体（名词）1997年3月，世界卫生组织克隆——遗传上同一机体或细胞系（株）的无性生殖。01DNA分子、基因片断、单克隆抗体的复制也认为是克隆。024.6动物细胞核移植动物细胞核移植01细胞全能性指已经分化了的和尚未分化的细胞具有发育成完整有机体的各种组织的潜在能力的性质。01全能性(Totipotency)已分化细胞的细胞核，仍能像胚胎细胞般，含有引导生物完全发育的所有遗传讯息。01分化细胞之全能性该如何重新启动？02分化细胞之全能性4.6动物细胞核移植4.6动物细胞核移植RobertBriggs4.6.2鱼类、两栖类的细胞核移植1952年，美，RobertBriggs和利用两栖类卵细胞建立细胞核移植技术1955豹蛙(Ranapipiens)囊胚细胞核去核卵母细胞