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细菌革兰染色法主讲人:王利沙
细菌革兰染色法1884年由丹麦病理学家ChristianGram创立的。可将所有的细菌区分为革兰阳性(G+)菌和革兰阴性(G-)菌两大类,是细菌学中最重要的鉴别染色法。
原理主要原因是细胞壁的结构和组成有差异。革兰阳性菌的细胞壁:肽聚糖含量高,层数多且厚,交联度高,结构致密,且类脂质含量低。革兰阴性菌的细胞壁肽聚糖层数少,较薄且交联度低,脂类含量高。用乙醇不易脱色用乙醇易脱色
仪器显微镜、载玻片、接种环、酒精灯、擦镜纸、吸水纸等。
试剂结晶紫染液、碘液、95%乙醇、稀释石炭酸复红染液、香柏油、无菌生理盐水、二甲苯。
菌种大肠杆菌培养物金黄色葡萄球菌培养物
步骤染色干燥固定水洗干燥涂片镜检
步骤涂片干燥固定
步骤涂片干燥固定染色滴加结晶紫染液,染色1min细水冲洗至洗出液无色初染
步骤涂片干燥固定染色滴加碘液,染色1min水洗媒染
步骤涂片干燥固定染色滴加95%乙醇,脱色20-30s水洗脱色
步骤涂片干燥固定染色滴加石炭酸复红染液,复染色1min水洗复染
步骤涂片干燥固定染色晾干镜检低倍镜到高倍镜自然晾干、电吹风吹干或用吸水纸吸干革兰阴性菌革兰阳性菌
实训结束后处理清洁显微镜染色玻片用洗衣粉水清洗,晾干后备用
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